5. KoncentrationsbestÀmning av flucytosin-svamp

Hoppa till: navigering, sök

Till innehÄllsförteckningen för Referensmetodik:Svampinfektioner


Bilaga 5

Flucytosin, koncentrationsbestÀmning med biologisk metod

Indikation

  • Kontrollera att:
    • -Terapeutiskt effektiva nivĂ„er erhĂ„lls
    • -Toxiska nivĂ„er ej uppnĂ„s

Princip : Med agardiffusionsmetod berÀknas den aktiva koncentrationen av Flucytosin (5-Fc) i serum utifrÄn kÀnda koncentrationer (standard) av samma antibiotikum. En agarplatta med jÀststam, kÀnslig för 5-Fc, förses med standard och patientprov i brunnar.

Plattan inkuberas över natt.

HÀmningszonerna runt standarden mÀts och sÀtts mot det logaritmiska vÀrdet för varje koncentration. Det ger en linjÀr kurva ur vilken patientprovets koncentration kan berÀknas.

Reagens

  • YNB-agarplattor 75 mL agar/platta
  • Humanserum
  • 5-Fc standard 200 - 6,25 mg/L spĂ€dd i humanserum
  • Förvaras i frys -20 °C
  • HĂ„llbar 1 Ă„r. FĂ„r frysas om
  • Oberoende kontroll t.ex. 50 mg/L
  • McFarland 0,5
  • JĂ€ststam Candida albicans H29

ProvsÀttning

  • -MĂ€rk en YNB-agarplatta med C. alb H29 och lab.nr. SĂ„ in agarplattan med en suspension av C. albicans motsvarande McFarland 0,5
  • -TĂ€ck hela agarytan
  • -Sug av överflödet
  • -Torka i termostat 35 °C ~ 10 min
  • -Stansa hĂ„l diam (3 mm) i agarplattan, 4 st hĂ„l för standard och 2 st för varje patientprov
  • -MĂ€rk hĂ„len: 1 st hĂ„l för varje standardkoncentration, 2 st hĂ„l för varje patientprov och 2 st hĂ„l för oberoende kontroll
  • - SĂ€tt 10 ”L/hĂ„l, frys ner resten av serumet
  • - Inkubera i 37 °C över natt
  • - MĂ€t hĂ€mningszonerna runt varje brunn

UtrÀkning

  • Det logaritmiska vĂ€rdet pĂ„ standardens antibiotikakoncentration sĂ€tts mot zondiametern sĂ„ man fĂ„r en linjĂ€r standardkurva.

Ekvationen y = kx + 1 vilken lÀmpligen Àr programmerad i en kalkylator.

Mata in standardens och patientprovets zondiametrar i kalkylatorn


Prestanda Metodvariation ± 20% för dubbelprov

MĂ€tintervall 6,25 - 200 mg/L

Om patientvÀrdet Àr >200 mg/L kan provet spÀdas i humanserum sÄ att det hamnar inom mÀtintervallet

Referensintervall

  • Prov före dos ~ 25 mg/L
  • Prov efter dos ~ 25 mg/L - 100 mg/L