Bilaga 3 (CNS)

(Omdirigerad frÄn Direkt immunfluorescens)
Hoppa till: navigering, sök

Till innehÄllsförteckningen för Referensmetodik: Infektioner i centrala nervsystemet



Bilaga 3

Detektion av bakterier i direktutstryk: Direkt immunfluorescens

Reagens

oftast lokalt tillverkade.

Fixering av utstryk

  • Lufttorka utstryket pĂ„ en plan yta,
  • Fixera över lĂ„ga.
  • Placera alternativt nĂ„gra droppar metanol pĂ„ objektglaset. LĂ„t ligga 2 min. LĂ„t kvarvarande metanol rinna av utan att skölja och lĂ„t utstryket lufttorka igen.

FĂ€rgningsprocedur

  • LĂ€gg en droppe av konjugatet pĂ„ det fixerade utstryket.
  • LĂ€gg dĂ€refter detta i fuktig kammare.
  • Inkubera 20 min i 37 °C.
  • Skölj objektglaset ymnigt i PBS.
  • StĂ€ll objektglaset i kyvett med destvatten i 5 min.
  • Ta upp objektglaset och torka försiktigt med filtrerpapper runt preparatet.
  • LĂ€gg pĂ„ ett tĂ€ckglas med buffrad glycerol: 1 del PBS pH 7,4 + 9 delar glycerol 87 % p.a.
  • Undersök i fluorescensmikroskop, 40 x 10 förstoring.