Luminex

Hoppa till: navigering, sök

Till innehÄllsförteckningen för Referensmetodik:MolekylÀrbiologisk diagnostik


Luminex

Teknologin Àr baserad pÄ flödescytometrisk analys av smÄ polysterenkulor (5,6 ”m). Kulorna Àr fÀrgade med tvÄ flourokromer och anvÀndning av olika mÀngder av dessa flourokromer skapar en vÀtskebaserad array med 100 olika kulor med unika spektra. Specifika oligonukleotider binds sedan till kulans yta för att möjliggöra hybridisering av templat-DNA till de olika kulorna i lösning. En tredje flourokrom anvÀnds för att markera templat-DNA, vilket i sin tur tillÄter simultan kvantitativ mÀtning av upp till 100 analyter i en reaktion. Templat-DNA amplifieras vanligtvis med multiplex PCR före hybridisering med kulorna och flödescytometrisk analys. Kulorna mÀts individuellt i instrumentet i en snabb ström dÄ de passerar tvÄ separata lasrar i instrumentet. Den ena lasern mÀter fÀrgkoden pÄ kulan och den andra kvantifierar intensiteten av den tredje flourokromen som markerar templat-DNA. Tusentals kulor kan mÀtas per sekund vilket resulterar i ett system kapabelt att mÀta och kvantifiera 100 analyter i en reaktion pÄ ett fÄtal sekunder.

I dagslÀget finns diverse kommersiellt tillgÀngliga reagens för analys av exempelvis luftvÀgs-, sepsis- och meningitpatogener.


REFERENSER

  • Bryant PA, Venter D, Robins-Browne R, Curtis N. Chips with everything: DNA microarrays in infectious diseases. Lancet Infect Dis. 2004 Feb;4(2):100-11.
  • Dunbar SA. Applications of Luminex xMAP technology for rapid, high-throughput multiplexed nucleic acid detection. Clin Chim Acta. 2006 Jan;363(1-2):71-82. Review.