Bilaga 6. Parasitologiska metoder - Versionshistorik

Jadwiga Krusnell: /* Bilaga 6 D. */

2012-04-19T15:05:24Z

Bilaga 6 D.

Jadwiga Krusnell: /* Mikroskopisk påvisning av trofozoiter efter trikrom-färgning */

2012-04-19T15:03:40Z

Mikroskopisk påvisning av trofozoiter efter trikrom-färgning

Jadwiga Krusnell: /* Bilaga 6 C. */

2012-04-19T15:03:28Z

Bilaga 6 C.

Jadwiga Krusnell: /* Bilaga 6 C. */

2012-04-19T15:02:03Z

Bilaga 6 C.

Jadwiga Krusnell: /* Bilaga 6 B. */

2012-04-19T15:00:17Z

Bilaga 6 B.

Jadwiga Krusnell: /* Bilaga 6 A. */

2012-04-19T14:58:42Z

Bilaga 6 A.

Jadwiga Krusnell: /* Mikroskopisk påvisning av cystor och maskägg efter formalin/etylacetat koncentration av feces */

2012-04-19T14:57:37Z

Mikroskopisk påvisning av cystor och maskägg efter formalin/etylacetat koncentration av feces

Magnus Thore den 17 januari 2010 kl. 09.30

2010-01-17T09:30:43Z

Magnus Thore: /* Mikroskopisk påvisning av cystor och maskägg efter formalin/etylacetat koncentration av feces */

2010-01-17T09:26:11Z

Mikroskopisk påvisning av cystor och maskägg efter formalin/etylacetat koncentration av feces

Magnus Thore: /* Referenser */

2009-11-17T12:36:42Z

Referenser

@@ Rad 24: / Rad 24: @@
 === Mikroskopisk påvisning av microsporidiasporer efter förstärkt trikromfärgning ===
 [[Kategori:Infektioner i mage och tarm]]
 [[Kategori:Laboratoriediagnostik-parasiter]]

@@ Rad 17: / Rad 17: @@
 === Mikroskopisk påvisning av trofozoiter efter trikrom-färgning ===
- Se länk [[PAR 03 Mikroskopisk påvisning av trofozoiter efter trikromfärgning|PAR 03 ]]
+Se länk [[PAR 03 Mikroskopisk påvisning av trofozoiter efter trikromfärgning|PAR 03 ]]
 == Bilaga 6 D. ==

@@ Rad 17: / Rad 17: @@
 === Mikroskopisk påvisning av trofozoiter efter trikrom-färgning ===
+  Se länk [[PAR 03 Mikroskopisk påvisning av trofozoiter efter trikromfärgning|PAR 03 ]]
 == Bilaga 6 D. ==

@@ Rad 130: / Rad 130: @@
 *2. WHO 1994. Bench Aids for the Diagnosis of Intestinal Parasites. Plate 5-9 Protozoa.
 *3. Ash L, Orihel C. Atlas of Human Parasitology. ASCP Press, Chicago, fourth edition, 1997.
 == Bilaga 6 D. ==

@@ Rad 9: / Rad 9: @@
 == Bilaga 6 B.==
 === Mikroskopisk påvisning av ''Cryptosporidium'', ''Cyclospora'' och ''Isosporao''ocystor efter färgning med modifierad Ziehl-Neelsen ===
+Se länk [[PAR 02 Ziehl-Neelsen färgning|PAR 02 ]]
 == Bilaga 6 C. ==

@@ Rad 7: / Rad 7: @@
 === Mikroskopisk påvisning av cystor och maskägg efter formalin/etylacetat koncentration av feces ===
 Se länk [[PAR 01 Cystor och maskägg, feces koncentration|PAR 01 ]]
 == Bilaga 6 B.==

@@ Rad 160: / Rad 160: @@
 *	Saltsyra i etanol
 Avfärgningslösning för Ziehl-Neelsen
 Blanda 10 mL konc HCl med 1990 mL 95 % etanol.
-•	Malakitgrönt 1 %
+*Blanda 10 mL konc HCl med 1990 mL 95 % etanol.
-Lös 1 g malakitgrönt i 100 mL destillerat vatten.
+*	Malakitgrönt 1 %
-•	DPX mounting medium
+*Lös 1 g malakitgrönt i 100 mL destillerat vatten.
-•	Positiv kontroll Ziehl-Neelsen färgning
+*•	DPX mounting medium
-Formalinfixerat fecesprov med Cryptosporidium-oocystor
+*•	Positiv kontroll Ziehl-Neelsen färgning
-•	Immersionsolja för ljusmikroskop
+*Formalinfixerat fecesprov med Cryptosporidium-oocystor
 *Analysprocedur
@@ Rad 177: / Rad 178: @@
 **1.	Märk objektglasets mattfält med labnummer. Positiv kontroll skall ingå i varje färgningsomgång.
-**2.	Stryk med pipettspetsen ut ca 20 µL av provmaterialet på objekt-glaset. Gör preparatet ca 15 mm i diameter.
+**2.	Stryk med pipettspetsen ut ca 20 µL av provmaterialet på objektglaset. Gör preparatet ca 15 mm i diameter.
 **3.	Låt preparatet lufttorka i minst 60 min.
 **4.	Fixera glaset 5 min i metanol i glaskyvett med lock.
-**5.	Lägg glaset på färgstället och täck med karbolfuchsin. Använd plast¬pasteur¬pipett. Färga 20 min.
+**5.	Lägg glaset på färgstället och täck med karbolfuchsin. Använd plastpasteurpipett. Färga 20 min.
 **6.	Skölj med rikligt rinnande kranvatten.
 **7.	Avfärga ett glas i taget med avfärgningslösning (saltsyra i etanol) tills den röda färgen är borta.
@@ Rad 193: / Rad 194: @@
 ==== Avläsning ====
-Granska hela preparatet. Använd 40x eller 50x objektiv för översikts-granskning och 100x immersionsobjektiv för verifiering. Mät storleken på eventuella oocystor med mätokular. För morfologiska kriterier av olika oocystor se under respektive parasitavsnitt.
+Granska hela preparatet. Använd 40x eller 50x objektiv för översiktsgranskning och 100x immersionsobjektiv för verifiering. Mät storleken på eventuella oocystor med mätokular. För morfologiska kriterier av olika oocystor se under respektive parasitavsnitt.
 '''Kvalitetssäkring'''
 *Internkontroll
-**Positiv kontroll: Fecesprov med känt innehåll av formaldehydfixerade Cryptosporidiumoocystor. Förvaras i kylskåp och behandlas som övriga prover.
+**Positiv kontroll: Fecesprov med känt innehåll av formaldehydfixerade ''Cryptosporidium''-oocystor. Förvaras i kylskåp och behandlas som övriga prover.
 **För bildmaterial se referens 4.
@@ Rad 256: / Rad 257: @@
 **•	Natriumklorid 0,9 %
-**	Albuminlösning
+**	Albuminlösning, Mayer´s albumin, Meridian (medföljer SAF-fixativrör Meridian , art nr 900212)
 **	Etanol 70 %
 *•	Trikromfärg
@@ Rad 298: / Rad 298: @@
 *6.	Droppa en droppe albuminlösning och en droppe av provet på ett objektglas märkt med labnr. Blanda om med en träpinne och gör ett tunt utstryk som varierar i tjocklek.
 *7.	Låt preparatet torka tills det ser "klibbigt" ut (ca 10 - 20 min).
 '''Fixering och färgningsprocedur'''. Låt överskottsvätska rinna av mot en allduk mellan varje kyvett.
@@ Rad 303: / Rad 304: @@
 *1.	Fixera glaset 30 min i 70 % etanol.
 *2.	Låt stå i trikromfärg 6 - 8 min. Torka försiktigt av överskottsfärg mot en allduk.
-*3.	Doppa glaset i avfärgningslösning (ättiksyra i etanol).
+*3.	Doppa glaset i avfärgningslösning (ättiksyra i etanol).Observera glaset noggrant. Stoppa ner det i nästa bad precis när färgen bör¬jar rinna från utstryket. Två snabba dopp brukar vara tillräckligt.
 *4.	Skölj 2 gånger i 95 % etanol.
 *5.	Låt stå i 95 % etanol 5 min.
@@ Rad 423: / Rad 423: @@
 *1. Ryan NJ, Sutherland G, Coughlan K, Globan M, Doultree, Marshall J, Baird, Pedersen J, Dwyer B. A new trichromeblue stain for detection of microsporidial species in urine, stool, and nasopharyngeal specimens. 1993;31:3264-3269.
-*2. Meridian Diagnostics, Inc. Para-PacTrichrome Blue. Produktinfor¬mation.
+*2. Meridian Diagnostics, Inc. Para-PacTrichrome Blue. Produktinformation.
 *3. Ash L, Orihel C. Atlas of Human Parasitology. ASCP Press, Chicago, fourth edition, 1997.
 *4. Rondamelli EG, Scaglia M. Atlas of human protozoa. Masson 1993.

@@ Rad 8: / Rad 8: @@
-'''Analysprincip:''' Formalinfixerad feces filtreras, skakas med etylacetat och centrifugeras för att separera maskägg, larver, cystor och oocystor från fett och skräp. Efter centrifugering bildas fyra skikt: i botten av röret ett se¬diment, sedan en formalinfas, en fettplugg med skräp och överst en etylacetatfas. Sedimentet granskas i ljus¬mikroskop. Materialet i sedimentet kan även användas till olika specialfärgningar för att identifiera specifika parasiter. Metoden är ej lämplig för påvisning av trofozoiter i feces.
+'''Analysprincip:''' Formalinfixerad feces filtreras, skakas med etylacetat och centrifugeras för att separera maskägg, larver, cystor och oocystor från fett och skräp. Efter centrifugering bildas fyra skikt: i botten av röret ett sediment, sedan en formalinfas, en fettplugg med skräp och överst en etylacetatfas. Sedimentet granskas i ljusmikroskop. Materialet i sedimentet kan även användas till olika specialfärgningar för att identifiera specifika parasiter. Metoden är ej lämplig för påvisning av trofozoiter i feces.
@@ Rad 37: / Rad 37: @@
 **	Etylacetat
-C4H8O2 p.a.
+C<sub>4</sub>H<sub>8</sub>O<sub>2</sub> p.a.
 Märkning: brandfarligt, hälsovådligt.
@@ Rad 56: / Rad 57: @@
 *5.	Häll över filtratet i ett märkt centrifugrör. Justera volymen med formalin till ca 7 mL. Se kommentar 2 om provet fixerats i SAF-fixativ.
 *6.	Tillsätt 3 mL etylacetat och sätt på skruvlocket. Skaka med skakapparat 15 sek eller 30 sek för hand.
+*7.	Centrifugera i minst 1 000 x g under 1 - 2 min. Behåll skruvlocket på. Centrifugera 5 min om ''Cryptosporidium'' undersökning är begärd (se kommentar 3).
 *8.	Röret innehåller nu fyra skikt. I botten ett sediment, sedan en formalinfas, en fettplugg och överst en etylacetatfas.
-*9.	Lossa försiktigt fettpluggen med en träpinne och häll av allt utom sedimen¬tet (som bör vara ganska litet, se kommentar 4). Häll avfallet i lämpligt kärl.
+*9.	Lossa försiktigt fettpluggen med en träpinne och häll av allt utom sedimentet (som bör vara ganska litet, se kommentar 4). Häll avfallet i lämpligt kärl.
 *10.	Torka av insidan av röret med en bomullspinne.
 *11.	Sätt vid behov till ett par droppar 0,9 % NaCl till bottensatsen.
 *12.	Låt röret stå och dunsta av i dragskåp innan avläsning.
 '''Kommentarer'''
@@ Rad 69: / Rad 70: @@
 *2.	Om provet sänts in i SAF-fixativ centrifugeras först filtratet enligt punkt 7 ovan. Supernatanten hälls av och 7 mL formalin tillsätts.
-*3.	Föreslagna centrifugeringstider och g-tal varierar mycket mellan olika publikationer. För koncentration av Cryptosporidium-oocystor rekom¬menderas längre centrifugeringstid (5 - 10 min) än för cystor och mask¬ägg (1 - 2 min).
+*3.	Föreslagna centrifugeringstider och g-tal varierar mycket mellan olika publikationer. För koncentration av ''Cryptosporidium''-oocystor rekommenderas längre centrifugeringstid (5 - 10 min) än för cystor och maskägg (1 - 2 min).
-*4.	Om bottensatsen är för tjock har man antagligen tagit för mycket feces¬blandning under punkt 3 ovan.
+*4.	Om bottensatsen är för tjock har man antagligen tagit för mycket fecesblandning under punkt 3 ovan.
@@ Rad 80: / Rad 81: @@
 Granska systematiskt hela det ofärgade preparatet med 10x objektiv eller med högre förstoring om så behövs. Det jodfärgade preparatet granskas med 25x objektiv eller högre.
-Maskägg syns i regel bra med 10x objektiv och utan jodfärgning, medan cystor lättare upptäcks och identifieras vid högre förstoring och med jodfärgning. An¬vänd mätokular när så erfordras.
+Maskägg syns i regel bra med 10x objektiv och utan jodfärgning, medan cystor lättare upptäcks och identifieras vid högre förstoring och med jodfärgning. Använd mätokular när så erfordras.
-Cryptosporidium-oocystor kan ibland upptäckas vid direktmikroskopi av sedi¬ment från koncentrationsmetoden. För konfirmering erfordras dock färgning med specifik metod. Se metodbeskrivning Ziehl-Neelsen färgning (Bilaga 6.2).
+''Cryptosporidium''-oocystor kan ibland upptäckas vid direktmikroskopi av sediment från koncentrationsmetoden. För konfirmering erfordras dock färgning med specifik metod. Se metodbeskrivning Ziehl-Neelsen färgning (Bilaga 6.2).
 För morfologiska kriterier hänvisas till respektive parasitavsnitt.
 === Kvalitetssäkring ===

← Äldre version		Versionen från 17 november 2009 kl. 12.36
Rad 428:		Rad 428:

	[[Kategori:Infektioner i mage och tarm]]		[[Kategori:Infektioner i mage och tarm]]
		+	[[Kategori:Laboratoriediagnostik-parasiter]]