Mycoplasma pneumoniae - Versionshistorik

Magnus Thore den 10 juli 2012 kl. 13.07

2012-07-10T13:07:35Z

Magnus Thore: /* Laboratoriediagnostik */

2009-12-13T14:06:25Z

Laboratoriediagnostik

Magnus Thore: /* Svarsrutiner */

2009-12-13T14:04:36Z

Svarsrutiner

Magnus Thore: /* Odling */

2009-12-13T14:04:16Z

Odling

Magnus Thore: /* b) Serologi */

2009-12-13T14:03:58Z

b) Serologi

Magnus Thore: /* a) Nukleinsyraamplifiering */

2009-12-13T14:03:03Z

a) Nukleinsyraamplifiering

Magnus Thore: /* Allmänt */

2009-12-13T14:02:07Z

Allmänt

Magnus Thore: /* Provtagning och transport */

2009-12-13T14:01:47Z

Provtagning och transport

Magnus Thore: /* Patogenes och patofysiologi */

2009-12-13T14:01:02Z

Patogenes och patofysiologi

Magnus Thore den 6 december 2009 kl. 21.49

2009-12-06T21:49:14Z

@@ Rad 8: / Rad 8: @@
 == ''Mycoplasma pneumoniae'' ==
+=== Smittämne ===
 Bakterier med de minsta kända genomen återfinns inom ordningen ''Mollicutes'' (”mjukt skinn”). Inom denna finns i dag mer än 150 bakteriearter beskrivna hörande till åtta olika genus, varvid de flesta arterna återfinns inom genus ''Mycoplasma'' (ordet refererar till fungusform). Genomets ringa storlek (hos vissa arter endast dubbelt så stort som hos de största virus) har sannolikt uppstått sekundärt genom degenerativ utveckling från klostridielika grampositiva bakterier.
@@ Rad 20: / Rad 17: @@
 === Patogenes och patofysiologi ===
 Närvaro av ''M. pneumoniae'' i orofarynx är som regel associerad med sjukdom. Bakterien smittar från person till person genom infekterat luftvägssekret varvid infektionsdosen kan vara mycket liten. Infektion uppstår när bakterier via specifikt P1-protein adhererar till receptor på luftvägsepitelet varvid ciliestas inträder. Den exakta mekanismen bakom organismens patogenicitet är inte känd, men den förblir huvudsakligen extracellulär och utövar sin effekt genom ytparasitism, varvid epitelcellerna blir allvarligt skadade. Möjligen överför bakterien toxiska substanser såsom väteperoxid genom epitelcellmembranet, men hittills har inget enstaka sådant ämne kunnat identifieras som orsak till cellskadan. ''M. pneumoniae'' inducerar produktion av autoantikroppar som kan reagera med olika vävnader, särskilt typ 1 antigen på erytrocyter.
 === Symtom och klinisk bild ===
 ''Mycoplasma pneumoniae'' är en av de organismer och därtill den i särklass vanligaste som förknippas med pneumoni orsakad av atypiska agens. Vanlig ålder för insjuknande är 5-20 år, men alla åldrar kan drabbas. Tidigare genomgången infektion ger inte säkert skydd mot återinsjuknande. Smittspridning inom familjen är typisk. Inkubationstiden varierar mellan knappt två upp till tre veckor. Sjukdomsdebuten är vanligen smygande, hos yngre som faryngit, hos ungdomar och äldre som trakeobronkit med typisk initialt icke produktiv, ibland paroxysmal hosta. Sjukdomskänsla, måttlig feber, huvud- och muskelvärk hör till bilden. Bullös myringit är typisk för ''Mycoplasma''-infektion. Hos upp till ca 1/3 av drabbade blir hostan alltmer ihållande och ofta blir sputa mukoida eller purulenta som tecken på pneumoni. Den drabbade är som regel endast måttligt påverkad. Ofta ringa kliniska fynd i kombination med normal vit blodbild står i kontrast till de utbredda pneumoniska infiltrat som kan ses vid lungröntgen. Symtombilden kan påtagligt förvärras, men som regel spontanläker infektionen inom 2 5 veckor. Antibiotikabehandling mildrar och förkortar sjukdomsförloppet men eradikerar inte mikroorganismerna vilka kan persistera i flera månader. Framförallt hos personer med hypogammaglobulinemi kan de påvisas ännu flera år efter infektion.
 Komplikationer är inte helt ovanliga. Extrapulmonella manifestationer kan delvis förklaras av autoimmuna processer, men direkt invasion av bakterier förekommer också till exempelvis likvor, hjärta och synovia. Kräkningar, diarré, erytema multiforme och artrit förekommer. Meningoencefalit, myelit och Guillan-Barré är manifestationer från nervsystemet. Nekrotiserande bronkit, myoperikardit och pankreatit är andra komplikationer. Hemolytisk anemi har beskrivits.
-=== Provtagning och transport ===
+== Provtagning och transport ==
 Pinnprov från bakre svalgväggen transporteras kylt till laboratoriet i PCR-buffert (TRIS-buffert, 0,01 M, pH 7,0 +- 0,05).

@@ Rad 35: / Rad 35: @@
 == Laboratoriediagnostik ==
+[[Mycoplasma pneumoniae-laboratoriediagnostik|Följ länken för detaljerad beskrivning]]
 === Allmänt ===
 Det föreligger ingen helt optimal metod för laboratoriediagnostik av ''M. pneumoniae'' – infektion idag. Det torde dock vara lämpligt att erbjuda klinikerna en PCR – baserad metod för att påvisa mikroorganismerna i svalgsekret. Vi föreslår därför för ''Mycoplasma pneumoniae'' en P1–adhesingenbaserad PCR som referensmetod att använda tillsammans med P1–adhesinantigenbaserad ELISA för påvisning av IgM eller IgG – antikroppar i ett akutserum och vid behov i parade sera.
 == Svarsrutiner ==

@@ Rad 85: / Rad 85: @@
 Vid PCR-positivitet rapporteras ''Mycoplasma pneumoniae'' påvisad.
-Fortfarande är specifik diagnos av Mycoplasma-infektion beroende av serologisk verifiering. En 4-faldig stegring i titer hos sera tagna med 2-3 veckors mellanrum indikerar aktuell infektion. Höga koncentrationer av IgM eller IgG i enstaka serumprov kan tyda på aktuell infektion, men verifierande konvalescentserum skall rekommenderas. Se för övrigt begränsningar i beskrivningen under referensmetodik ovan.
+Fortfarande är specifik diagnos av ''Mycoplasma''-infektion beroende av serologisk verifiering. En 4-faldig stegring i titer hos sera tagna med 2-3 veckors mellanrum indikerar aktuell infektion. Höga koncentrationer av IgM eller IgG i enstaka serumprov kan tyda på aktuell infektion, men verifierande konvalescentserum skall rekommenderas. Se för övrigt begränsningar i beskrivningen under referensmetodik ovan.
 == Laboratorierapportering ==

@@ Rad 59: / Rad 59: @@
 ==== Odling ====
-Isolering av organismen från svalg – eller nasofarynx¬prov genom odling har länge varit standard för diagnostiken. Primärisolering sker därvid exempelvis i selektivt (penicillintillsats) difasiskt SP 4 glukosmedium i kombination med primär- och sekundärodling på agarplattor (PPLO - agar). Inkubering sker i 5 – 10 % CO<SUB>2</SUB> – miljö. Växt kan dock ta ända upp till tre veckor, varför odlingstekniken knappast längre har någon plats i rutindiagnostiken.
+Isolering av organismen från svalg – eller nasofarynxprov genom odling har länge varit standard för diagnostiken. Primärisolering sker därvid exempelvis i selektivt (penicillintillsats) difasiskt SP 4 glukosmedium i kombination med primär- och sekundärodling på agarplattor (PPLO - agar). Inkubering sker i 5 – 10 % CO<SUB>2</SUB> – miljö. Växt kan dock ta ända upp till tre veckor, varför odlingstekniken knappast längre har någon plats i rutindiagnostiken.
 ==== Köldagglutinationstest ====

@@ Rad 52: / Rad 52: @@
 ELISA – metoder erbjuder ofta högre sensitivitet och specificitet än KB och används därför i dag vid ett flertal laboratorier. Kommersiella kit baserade på olika mer eller mindre renade antigenpreparationer finns tillgängliga. De mest specifika använder P1 – adhesinproteinet som antigen och är dessutom antikroppsspecifika. IgM – specifik EIA kan därvid användas för diagnostik av akut ''M. pneumoniae'' –infektion. Vissa tillverkare erbjuder också test för IgA – antikroppar vilka vid primär infektion ofta utvecklas parallellt med IgM – antikropparna. Värdet av IgA –testning är oklart. Ofta räcker analys av bara ett enda serumprov taget mot slutet av andra sjukdomsveckan med IgM – specifikt test. Exempel på sådan test är Meridian Immunocard.
-Känsligheten vid sådan diagnostik är dock inte högre än ca 50 –60 % beroende på att många patienter, särskilt äldre och vid reinfektion ger ringa eller inget IgM-svar. Vid testning av parade sera med ELISA som detekterar såväl IgG - som IgM – antikroppar, t.ex. med REMEL EIA, kan sensitiviteten öka till 95 %. Detta innebär att ett andra serumprov bör tas vid kvarstående misstanke om mykoplasma – infektion även om testningen av det första provet utföll negativ. Se [[bilaga 4.1]].
+Känsligheten vid sådan diagnostik är dock inte högre än ca 50 –60 % beroende på att många patienter, särskilt äldre och vid reinfektion ger ringa eller inget IgM-svar. Vid testning av parade sera med ELISA som detekterar såväl IgG - som IgM – antikroppar, t.ex. med REMEL EIA, kan sensitiviteten öka till 95 %. Detta innebär att ett andra serumprov bör tas vid kvarstående misstanke om mykoplasma – infektion även om testningen av det första provet utföll negativ. Se [[Bilaga 4 Infektionsserologi och antigenpåvisning-NLI]].
 === Alternativa diagnostiska metoder ===

@@ Rad 46: / Rad 46: @@
 ==== a) Nukleinsyraamplifiering ====
-Ett antal tekniker baserade på nukleinsyraamplifiering av prov från i första hand svalg men också nasofarynx, sputum och BAL har prövats och många laboratorier erbjuder i dag PCR – varianter för diagnostik av mykoplasma – infektioner. Kommersiella metoder använder primers för 16S rekombinant RNA–, P1 – adhesingen eller ATPas operon (MP5 –1, 5 –2). Jämfört med odling varierar sensitiviteten mellan 55 –100 %. De flesta undersökningar anger dock sensitiviteten till ca 100 %. Testerna är mindre väl karakteriserade avseende specificitet. Jämförelser mellan PCR och odling eller olika serologiska metoder, inkluderande immunfluorescens talar i vissa studier för att PCR - positivitet kan bero på persisterande bakterieceller efter genomgången infektion eller förekomst av mykoplasma hos symtomlösa bärare. Överensstämmelsen mellan två realtids-PCR-metoder baserade på 16S RNA och P1-primers har visats vara mycket god. Lovande försök med multiplex realtids-PCR för atypisk pneumoni för i första hand ''M. pneumoniae'' och ''Chlamydophila pneumoniae'' har gjorts och sådana metoder kommer sannolikt snart att marknadsföras. Se bilaga 3.1 och 3.2.
+Ett antal tekniker baserade på nukleinsyraamplifiering av prov från i första hand svalg men också nasofarynx, sputum och BAL har prövats och många laboratorier erbjuder i dag PCR – varianter för diagnostik av mykoplasma – infektioner. Kommersiella metoder använder primers för 16S rekombinant RNA–, P1 – adhesingen eller ATPas operon (MP5 –1, 5 –2). Jämfört med odling varierar sensitiviteten mellan 55 –100 %. De flesta undersökningar anger dock sensitiviteten till ca 100 %. Testerna är mindre väl karakteriserade avseende specificitet. Jämförelser mellan PCR och odling eller olika serologiska metoder, inkluderande immunfluorescens talar i vissa studier för att PCR - positivitet kan bero på persisterande bakterieceller efter genomgången infektion eller förekomst av mykoplasma hos symtomlösa bärare. Överensstämmelsen mellan två realtids-PCR-metoder baserade på 16S RNA och P1-primers har visats vara mycket god. Lovande försök med multiplex realtids-PCR för atypisk pneumoni för i första hand ''M. pneumoniae'' och ''Chlamydophila pneumoniae'' har gjorts och sådana metoder kommer sannolikt snart att marknadsföras. Se [[Bilaga 3 Nukleinsyrapåvisning-NLI]].
 ==== b)	Serologi ====

@@ Rad 39: / Rad 39: @@
 === Allmänt ===
-Det föreligger ingen helt optimal metod för laboratoriediagnostik av M. pneumoniae – infektion idag. Det torde dock vara lämpligt att erbjuda klinikerna en PCR – baserad metod för att påvisa mikroorganismerna i svalgsekret. Vi föreslår därför för Mycoplasma pneumoniae en P1–adhesingenbaserad PCR som referensmetod att använda tillsammans med P1–adhesinantigenbaserad ELISA för påvisning av IgM eller IgG – antikroppar i ett akutserum och vid behov i parade sera.
+Det föreligger ingen helt optimal metod för laboratoriediagnostik av ''M. pneumoniae'' – infektion idag. Det torde dock vara lämpligt att erbjuda klinikerna en PCR – baserad metod för att påvisa mikroorganismerna i svalgsekret. Vi föreslår därför för ''Mycoplasma pneumoniae'' en P1–adhesingenbaserad PCR som referensmetod att använda tillsammans med P1–adhesinantigenbaserad ELISA för påvisning av IgM eller IgG – antikroppar i ett akutserum och vid behov i parade sera.
 === Referensmetodik ===

@@ Rad 31: / Rad 31: @@
 === Provtagning och transport ===
-Pinnprov från bakre svalgväggen transporteras kylt till laboratoriet i PCR-buffert (TRIS-buffert, 0,01 M, pH 7,0  0,05).
+Pinnprov från bakre svalgväggen transporteras kylt till laboratoriet i PCR-buffert (TRIS-buffert, 0,01 M, pH 7,0 +- 0,05).
 Se i övrigt resp. provlokal.