Skillnad mellan versioner av "PAR 06 Schistosoma ägg i urin"

Från Referensmetodik för laboratoriediagnostik
Hoppa till navigering Hoppa till sök
 
(24 mellanliggande sidversioner av samma användare visas inte)
Rad 1: Rad 1:
 
+
'''Huvudartikel''', publicerad mars 2012.                              
'''Huvudartikel''', publicerad april 2011. '''Texten är preliminär, ännu ej beslutad genom konsensusförfarande'''.                             
 
 
----
 
----
 
Till innehållsförteckngen för ''[[Referensmetodik:Parasitologisk diagnostik]]''
 
Till innehållsförteckngen för ''[[Referensmetodik:Parasitologisk diagnostik]]''
 +
---------
 +
 +
==Mikroskopisk påvisning av ''Schistosoma''-ägg i urin==
 +
===Analysprincip===
 +
Urin filtreras (vid små volymer klar urin), sedimenteras i kombination med filtrering eller centrifugering (stora volymer), eller endast centrifugeras (vid grumlig urin och/eller mycket små volymer) för att erhålla ett sediment som granskas i ljusmikroskop med avseende på förekomst av ''Schistosoma''-ägg (vanligen ''S. haematobium'').
 +
 +
===Schema: Påvisning av ''Schistosoma''-ägg i urin.===
  
Mikroskopisk påvisning av Schistosoma-ägg i urin
+
[[Fil:Schema urinprov schistosoma.jpg|thumb|400px|center|Påvisning av ''Schistosoma''-ägg i urin.]]
Analysprincip
 
Urin filtreras (vid små volymer klar urin), sedimenteras i kombination med filtrering eller centrifugering (stora volymer), eller endast centrifugeras (vid grumlig urin och/eller mycket små volymer) för att erhålla ett sediment som granskas i ljusmikroskop med avseende på förekomst av Schistosoma-ägg (vanligen S. haematobium).
 
Speciell utrustning
 
ljusmikroskop med objektiv: 10x, 40x, samt med kalibrerat mätkular
 
membranfilter, porstorlek 12 mikrometer
 
filterhållare
 
koniskt mätglas (B)
 
  
Analysprocedur
+
===Speciell utrustning===
A) Filtrering (används vid mindre volymer – ”4 timmars urin” – och klar urin)
+
*ljusmikroskop med objektiv: 10x, 40x, samt med kalibrerat mätkular
1. Blötlägg ett membranfilter, med porstorlek 12 mikrometer, i en bägare med 0,9 % NaCl tillsammans med filterringen till en filterhållare.
+
*membranfilter, porstorlek 12 mikrometer
2. Montera filterhållare och filter: det våta filtret läggs på underdelen av filterhållaren, ringen läggs ovanpå och sist skruvas överdelen på. Kontrollera noga att filtret sitter rakt.
+
*filterhållare
3. Mät urinmängden i ett mätglas. Häll över urinen i en glasbägare.
+
*koniskt mätglas (analysprocedur B)
4. Dra upp urin i en 10–50 mL plastspruta och anslut sprutan till filterhållaren.  
+
 
5. Pressa urinen långsamt genom filtret, som hålls över en slaskflaska.  
+
===Analysprocedur===
6. Demontera och fyll sprutan på nytt och fortsätt tills all urin är filtrerad.
+
====A) Filtrering (används vid mindre volymer – ”4 timmars urin” – och klar urin)====
7. Demontera och fyll sprutan med 10 mL 0,9 % NaCl och pressa igenom filtret.
+
# Blötlägg ett membranfilter, med porstorlek 12 mikrometer, i en bägare med 0,9 % NaCl tillsammans med filterringen till en filterhållare.
8. Demontera, fyll sprutan med ca 10 mL luft och pressa igenom filtret.
+
# Montera filterhållare och filter: det våta filtret läggs på underdelen av filterhållaren, ringen läggs ovanpå och sist skruvas överdelen på. Kontrollera noga att filtret sitter rakt.
9. Skruva isär filterhållaren. Flytta filtret med en pincett och lägg det upp och ned på ett objektglas. Tillsätt en droppe 0,9 % NaCl.  
+
# Mät urinmängden i ett mätglas. Häll över urinen i en glasbägare.
10. Täck med täckglas.
+
# Dra upp urin i en 10–50 mL plastspruta och anslut sprutan till filterhållaren.  
B) Sedimentering kombinerat med filtrering eller centrifugering (används vid stora urinvolymer, som t.ex. hel dygnsmängd).
+
# Pressa urinen långsamt genom filtret, som hålls över en slaskflaska.  
1. Mät urinvolymen.
+
# Demontera och fyll sprutan på nytt och fortsätt tills all urin är filtrerad.
2. Häll över urinen i ett koniskt mätglas.
+
# Demontera och fyll sprutan med 10 mL 0,9 % NaCl och pressa igenom filtret.
3. Låt sedimentera 30–60 min.
+
# Demontera, fyll sprutan med ca 10 mL luft och pressa igenom filtret.
4. Sug försiktigt av supernatanten med vattensug utan att grumla upp bottensatsen. Lämna ca 100 mL i botten.
+
# Skruva isär filterhållaren. Flytta filtret med en pincett och lägg det upp och ned på ett objektglas. Tillsätt en droppe 0,9 % NaCl.  
5. Filtrera bottensatsen enligt ovan (A) eller centrifugera enligt C vid mycket grumlig bottensats.
+
# Täck med täckglas.
C) Centrifugering (görs när urinen är mycket grumlig, t.ex. p.g.a. epitelceller eller blod, samt vid mycket små urinvolymer)
+
====B) Sedimentering kombinerat med filtrering eller centrifugering (används vid stora urinvolymer, som t.ex. hel dygnsmängd).====
1. Mät urinvolymen.
+
# Mät urinvolymen.
2. Fördela den i 10 eller 50 mL rör beroende på volymen.
+
# Häll över urinen i ett koniskt mätglas.
3. Centrifugera i 500 x g under 2 min.
+
# Låt sedimentera 30–60 min.
4. Häll av supernatanten.
+
# Sug försiktigt av supernatanten med vattensug utan att grumla upp bottensatsen. Lämna ca 100 mL i botten.
5. Droppa sedimentet på objektsglas och lägg på ett täckglas.
+
# Filtrera bottensatsen enligt ovan (A) eller centrifugera enligt C vid mycket grumlig bottensats.
Avläsning
+
====C) Centrifugering (görs när urinen är mycket grumlig, t.ex. p.g.a. epitelceller eller blod, samt vid mycket små urinvolymer)====
Avläsning efter filtrering (A) eller sedimentering kombinerat med filtrering (B)  
+
# Mät urinvolymen.
1. Undersök hela filtret i ljusmikroskop med 10x objektiv.  
+
# Fördela den i 10 eller 50 mL rör beroende på volymen.
2. Bestäm Schistosoma-art (se tabell: Schistosoma). Alla arter har ett genomskinligt äggskal och innehåller ett miracidium. Tomma ägg och fria miracidier kan förekomma.
+
# Centrifugera i 500 x g under 2 min.
3. Räkna eventuellt antalet ägg. Notera i objektiv 40x om äggen innehåller (levande) miracidier. OBS! detta går inte att bedöma om urinen blandats med konserveringsmedel.
+
# Häll av supernatanten.
Avläsning efter centrifugering (C) eller sedimentering kombinerat med centrifugering (B)
+
# Droppa sedimentet på objektsglas och lägg på ett täckglas.
1. Lägg upp en droppe av sedimentet på objektglas och täck med täckglas.  
+
===Avläsning===
2. Granska i ljusmikroskop med 10x objektiv.  
+
=====Avläsning efter filtrering (A) eller sedimentering kombinerat med filtrering (B)=====
3. Gör flera upplägg tills hela sedimentet är undersökt.
+
# Undersök hela filtret i ljusmikroskop med 10x objektiv.  
4. Bestäm Schistosoma-art (se tabell: Schistosoma).  
+
# Bestäm'' Schistosoma''-art (se tabell i huvudartikel [[Schistosoma spp.]]). Alla arter har ett genomskinligt äggskal och innehåller ett miracidium. Tomma ägg och fria miracidier kan förekomma.
5. Räkna eventuellt antalet ägg. Notera i objektiv 40x om äggen innehåller (levande) miracidier. OBS! detta går inte att bedöma om urinen blandats med konserveringsmedel.
+
# Räkna eventuellt antalet ägg. Notera i objektiv 40x om äggen innehåller (levande) miracidier. OBS! detta går inte att bedöma om urinen blandats med konserveringsmedel.
Anmärkning
+
=====Avläsning efter centrifugering (C) eller sedimentering kombinerat med centrifugering (B)=====
Även S. mansoni-ägg kan utsöndras i urin.
+
# Lägg upp en droppe av sedimentet på objektglas och täck med täckglas.
Kvalitetssäkring
+
# Granska i ljusmikroskop med 10x objektiv.  
Intern:  För lämpligt bildmaterial se referens 4 och 5
+
# Gör flera upplägg tills hela sedimentet är undersökt.
Extern:  Schistosoma-ägg ingår i UK-NEQAS:s utskick.  
+
# Bestäm ''Schistosoma''-art (se tabell i huvudartikel [[Schistosoma spp.]]).  
Svarsrutin
+
# Räkna eventuellt antalet ägg. Notera i objektiv 40x om äggen innehåller (levande) miracidier. OBS! detta går inte att bedöma om urinen blandats med konserveringsmedel.
Negativt prov: Inga ägg av Schistosoma spp påvisade.
+
=====Anmärkning=====
 +
Även ''S. mansoni''-ägg kan utsöndras i urin.
 +
 
 +
===Kvalitetssäkring===
 +
'''Intern:''' För lämpligt bildmaterial se referens 4 och 5.
 +
 
 +
'''Extern:''' ''Schistosoma''-ägg ingår i UK-NEQAS:s utskick.  
 +
===Svarsrutin===
 +
Negativt prov: Inga ägg av ''Schistosoma'' spp. påvisade.
 
X mL urin undersökt.
 
X mL urin undersökt.
Positivt prov: Ägg av Schistosoma påvisade (ange species).
+
 
 +
Positivt prov: Ägg av ''Schistosoma'' påvisade (ange species).
 
Antal ägg/X mL urin. Levande/ej levande ägg.
 
Antal ägg/X mL urin. Levande/ej levande ägg.
Referenser
+
 
 +
==Litteraturhänvisningar==
 
1. Braun-Munzinger RA. 1986. Quantitative egg counts in schistosomiasis surveys. Parasitology Today 2: 82-3
 
1. Braun-Munzinger RA. 1986. Quantitative egg counts in schistosomiasis surveys. Parasitology Today 2: 82-3
 +
 
2. Dazo B, Bilas J. 1974. Two new field techniques for detection and counting of Schistosoma haematobium eggs in urine samples with an evaluation of both methods Bulletin of the World Health Organization 51: 399-408
 
2. Dazo B, Bilas J. 1974. Two new field techniques for detection and counting of Schistosoma haematobium eggs in urine samples with an evaluation of both methods Bulletin of the World Health Organization 51: 399-408
 +
 
3. Peters P, Mahmoud A, Warren K, Ouma J, Siongok T. 1976. Field studies of a rapid, accurate means of quantifying Schistosoma haematobium eggs in urine samples. Bulletin of the World Health Organization 54: 159-62.
 
3. Peters P, Mahmoud A, Warren K, Ouma J, Siongok T. 1976. Field studies of a rapid, accurate means of quantifying Schistosoma haematobium eggs in urine samples. Bulletin of the World Health Organization 54: 159-62.
4. WHO 1994. Bench Aids for the Diagnosis of Intestinal Parasites.  
+
 
 +
4. WHO 1994. Bench Aids for the Diagnosis of Intestinal Parasites.
 +
 
5. Ash L, Orihel T. Atlas of Human Parasitology. ASCP Press, Chicago.
 
5. Ash L, Orihel T. Atlas of Human Parasitology. ASCP Press, Chicago.
 +
 +
 +
[[Kategori:Parasiter]]
 +
[[Kategori:Laboratoriediagnostik]]
 +
[[Kategori:Laboratoriediagnostik-parasiter]]

Nuvarande version från 6 december 2012 kl. 14.53

Huvudartikel, publicerad mars 2012.


Till innehållsförteckngen för Referensmetodik:Parasitologisk diagnostik


Mikroskopisk påvisning av Schistosoma-ägg i urin[redigera]

Analysprincip[redigera]

Urin filtreras (vid små volymer klar urin), sedimenteras i kombination med filtrering eller centrifugering (stora volymer), eller endast centrifugeras (vid grumlig urin och/eller mycket små volymer) för att erhålla ett sediment som granskas i ljusmikroskop med avseende på förekomst av Schistosoma-ägg (vanligen S. haematobium).

Schema: Påvisning av Schistosoma-ägg i urin.[redigera]

Påvisning av Schistosoma-ägg i urin.

Speciell utrustning[redigera]

  • ljusmikroskop med objektiv: 10x, 40x, samt med kalibrerat mätkular
  • membranfilter, porstorlek 12 mikrometer
  • filterhållare
  • koniskt mätglas (analysprocedur B)

Analysprocedur[redigera]

A) Filtrering (används vid mindre volymer – ”4 timmars urin” – och klar urin)[redigera]

  1. Blötlägg ett membranfilter, med porstorlek 12 mikrometer, i en bägare med 0,9 % NaCl tillsammans med filterringen till en filterhållare.
  2. Montera filterhållare och filter: det våta filtret läggs på underdelen av filterhållaren, ringen läggs ovanpå och sist skruvas överdelen på. Kontrollera noga att filtret sitter rakt.
  3. Mät urinmängden i ett mätglas. Häll över urinen i en glasbägare.
  4. Dra upp urin i en 10–50 mL plastspruta och anslut sprutan till filterhållaren.
  5. Pressa urinen långsamt genom filtret, som hålls över en slaskflaska.
  6. Demontera och fyll sprutan på nytt och fortsätt tills all urin är filtrerad.
  7. Demontera och fyll sprutan med 10 mL 0,9 % NaCl och pressa igenom filtret.
  8. Demontera, fyll sprutan med ca 10 mL luft och pressa igenom filtret.
  9. Skruva isär filterhållaren. Flytta filtret med en pincett och lägg det upp och ned på ett objektglas. Tillsätt en droppe 0,9 % NaCl.
  10. Täck med täckglas.

B) Sedimentering kombinerat med filtrering eller centrifugering (används vid stora urinvolymer, som t.ex. hel dygnsmängd).[redigera]

  1. Mät urinvolymen.
  2. Häll över urinen i ett koniskt mätglas.
  3. Låt sedimentera 30–60 min.
  4. Sug försiktigt av supernatanten med vattensug utan att grumla upp bottensatsen. Lämna ca 100 mL i botten.
  5. Filtrera bottensatsen enligt ovan (A) eller centrifugera enligt C vid mycket grumlig bottensats.

C) Centrifugering (görs när urinen är mycket grumlig, t.ex. p.g.a. epitelceller eller blod, samt vid mycket små urinvolymer)[redigera]

  1. Mät urinvolymen.
  2. Fördela den i 10 eller 50 mL rör beroende på volymen.
  3. Centrifugera i 500 x g under 2 min.
  4. Häll av supernatanten.
  5. Droppa sedimentet på objektsglas och lägg på ett täckglas.

Avläsning[redigera]

Avläsning efter filtrering (A) eller sedimentering kombinerat med filtrering (B)[redigera]
  1. Undersök hela filtret i ljusmikroskop med 10x objektiv.
  2. Bestäm Schistosoma-art (se tabell i huvudartikel Schistosoma spp.). Alla arter har ett genomskinligt äggskal och innehåller ett miracidium. Tomma ägg och fria miracidier kan förekomma.
  3. Räkna eventuellt antalet ägg. Notera i objektiv 40x om äggen innehåller (levande) miracidier. OBS! detta går inte att bedöma om urinen blandats med konserveringsmedel.
Avläsning efter centrifugering (C) eller sedimentering kombinerat med centrifugering (B)[redigera]
  1. Lägg upp en droppe av sedimentet på objektglas och täck med täckglas.
  2. Granska i ljusmikroskop med 10x objektiv.
  3. Gör flera upplägg tills hela sedimentet är undersökt.
  4. Bestäm Schistosoma-art (se tabell i huvudartikel Schistosoma spp.).
  5. Räkna eventuellt antalet ägg. Notera i objektiv 40x om äggen innehåller (levande) miracidier. OBS! detta går inte att bedöma om urinen blandats med konserveringsmedel.
Anmärkning[redigera]

Även S. mansoni-ägg kan utsöndras i urin.

Kvalitetssäkring[redigera]

Intern: För lämpligt bildmaterial se referens 4 och 5.

Extern: Schistosoma-ägg ingår i UK-NEQAS:s utskick.

Svarsrutin[redigera]

Negativt prov: Inga ägg av Schistosoma spp. påvisade. X mL urin undersökt.

Positivt prov: Ägg av Schistosoma påvisade (ange species). Antal ägg/X mL urin. Levande/ej levande ägg.

Litteraturhänvisningar[redigera]

1. Braun-Munzinger RA. 1986. Quantitative egg counts in schistosomiasis surveys. Parasitology Today 2: 82-3

2. Dazo B, Bilas J. 1974. Two new field techniques for detection and counting of Schistosoma haematobium eggs in urine samples with an evaluation of both methods Bulletin of the World Health Organization 51: 399-408

3. Peters P, Mahmoud A, Warren K, Ouma J, Siongok T. 1976. Field studies of a rapid, accurate means of quantifying Schistosoma haematobium eggs in urine samples. Bulletin of the World Health Organization 54: 159-62.

4. WHO 1994. Bench Aids for the Diagnosis of Intestinal Parasites.

5. Ash L, Orihel T. Atlas of Human Parasitology. ASCP Press, Chicago.