Bilaga 2 (CNS)

Till innehållsförteckningen för Referensmetodik: Infektioner i centrala nervsystemet

---

Bilaga 2

Detektion av bakterier i direktutstryk: Akridinorangefärgning

Reagens

• Akridinorange, brukslösning
  • Akridinorange 5 mg
  • Acetatbuffert 0,2 mol/L ph 4,0 100mL

VARNING! Akridinorange är cancerframkallande. Använd handskar!

Fixering av utstryk

• Lufttorka utstryket på en plan yta.
• Fixera över låga.
• Placera alternativt några droppar metanol på objektglaset. Låt ligga 2 min. Låt kvarvarande metanol rinna av utan att skölja och låt utstryket lufttorka igen.

Färgningsprocedur

• Flöda det fixerade utstryket med akridinorangelösning.
• Låt ligga 2 min.
• Skölj med kranvatten.
• Torka objektglaset.
• Undersök utstryket i fluorescensmikroskop.

Detektionsgränsen anges till i >=$10^{4}$ CFU/mL. Avläsning kan ske vid 400x förstoring.