Bilaga 2 (CNS)
Version från den 1 november 2009 kl. 08.12 av Magnus Thore (diskussion | bidrag) (Skapade sidan med '''Till innehållsförteckningen för Referensmetodik: Infektioner i centrala nervsystemet'' ---- == Bilaga 2 == === Detektion av bakterier i direktutstryk: Akridinorang…')
Till innehållsförteckningen för Referensmetodik: Infektioner i centrala nervsystemet
Bilaga 2
Detektion av bakterier i direktutstryk: Akridinorangefärgning
Reagens
- Akridinorange, brukslösning
- Akridinorange 5 mg
- Acetatbuffert 0,2 molfL pil 4,0 10OmL
VARNING! Akridinorange är cancerframkallande. Använd handskar!
Fixering av utstryk
- Lufttorka utstryket på en plan yta.
- Fixera över låga.
- Placera alternativt några droppar metanol på objektglaset. Låt ligga 2 min. Låt kvarvarande metanol rinna av utan att skölja och låt utstryket lufttorka igen.
Färgningsprocedur
- Flöda det fixerade utstryket med akridinorangelösning.
- Låt ligga 2 min.
- Skölj med kranvatten.
- Torka objektglaset.
- Undersök utstryket i fluorescensmikroskop.
Detektionsgränsen anges till i >=10e4 CFU/mL. Avläsning kan ske vid 400x förstoring.