Provtagning och transport till laboratoriet (ögoninfektioner)
Till innehållsförteckningen för Referensmetodik:Ögoninfektioner
Provtagning och transport till laboratoriet (Ögoninfektioner)
(Se även sammanställning av Provtagningsanvisningar i tabellform)
Allmänt
Vid lokalanestesi inför provtagning skall anestesimedel utan konserveringsmedel användas. Lokalbedövmng är sällan aktuell vid provtagning för konjunktivit, men väl vid keratit och eventuellt som tillskott till blockadanestesin vid endoftalmit.
Relevanta bakteriologiska odlingar skall självklart tas innan antibiotikabehandling påbörjas, om inte behandlingen därigenom fördröjs avsevärt. I de flesta fall är det en fördel om provmaterial kan transporteras till kliniskt mikrobiologiskt laboratorium och där fördelas på odlingsmedier. För konjunktivalodlingar där prov tas på bomullspinne som förvaras/transporteras i särkilt transportstubstrat är detta inget problem. Aktuella bakterier klarar minst 24 timmar på detta sätt, mest känsliga för transporttid är gonokocker.
Vid endoftalmit bör material aspireras från såväl främre kammare som glaskropp. Förseglad spruta måste nå laboratoriet inom ett par timmar. Dessa patienter vårdas ofta vid regionsjukhus där det finns laboratorieservice veckan runt och under stor del av dygnet varför transporttiden sällan är ett problem.
Vid keratit, där bara små mängder provmaterial kan erhållas, måste odlingsmedirna inokuleras direkt i samband med provtagningen. Det är därför nödvändigt att agarplattor och buljonger finns att tillgå vid ögonkliniken och att alla ögonläkare är införstådda med såväl provtagningen som hur provsättningen skall ske Vätska från linsbehållaren, och gärna också själva kontaktlinsen, skall skickas till odling vid kontaktlins-keratit! Enklast sker detta genom att hela kontaktlinsbehållaren med lins och vätska sänds in till laboratoriet.
Konjunktivit, blefarit, dakryocystit
Konjunktivalsekret från nedre fornix uppfångas med kolad bomullspinne. Bomullspinnen bör fuktas i steril koksaltlösning och sedan rullas över tarsala konjunktiva och fornix. Ett jämförande odlingsprov från andra ögat, vare sig det är infekterat eller ej, är av värde. Provtagningspinnen nedföres i ett rör med transportsubstrat (“Stuartrör”).
Provtagning för klamydia- och virusdiagnostik sker på liknande sätt men med torr, särskild provtagningspinne och särskilda transportsubstrat. Provtagning för diagnostik av C. trachomatis ska ske före provtagning med kolad pinne, eftersom kolpartiklarna i provtagningspinnen kan störa diagnostiken. Vid virus- och klamydiafrågeställningar är det viktigt att gnugga provtagningspinnen mot slemhinnan för att få med epitelceller.
Dakryocystit diagnostiseras genom provtagning från mediala ögonvrån. Man kan pressa över tårsäcken för att få regurgitat. Vid abscessbildning kan man eftersträva aspirat. Substrat som ovan.
Vid bakteriell blefarit tas prov från båda ögonens övre ögonlockskant med kolad bomullspinne doppad i steril koksaltlösning. Placeras i rör med transportsubstrat och skickas till laboratoriet som inkuberar provet på hämatinagar-platta samtidigt tas konjunktivalodlingar från båda ögonen.
Direktmikroskopi kan vara av värde vid konjunktiviter, speciellt vid frågeställningen gonokocker. Gramfärgning kan påvisa bakterier medan specialfärgningar används för diagnostik av Chlamydia trachomatis och virus.
Stryk ut lite sekret på ett sprittvättat, id-märkt objektsglas och låt det lufttorka. Markera på glaset i förväg var provmaterialet sätts, helst genom att rispa glaset med diamant. Insänds i detta skick till laboratoriet.
Keratit
Provtagning vid keratit skall göras av ögonläkare!
Ta först konjunktivalodling enligt ovan. Enbart konjunktivalodling har dock litet värde vid diagnostik av bakteriella keratiter. Efter lokalanestesi skrapas korneahärden ren från täckande fibrin och var med kolad bomullspinne. Detta material används för att inokulera övre halvan av plattor med hämatinagar, blodagar och sabouraudagar. Keratithärden skrapas därefter med kanylspets eller sterilt knivblad. Stryk ut på nedre halvan av plattorna med flera korta stryk per platta. Flera skrap krävs för att inokulera alla plattor och 2 sprittvättade, förmärkta objektsglas. Knivbladet eller kanylen stoppas slutligen i ett rör med odlingsbuljong under stor försiktighet för att undvika kontamination. Om transport till laboratoriet inte kan ske omedelbart bör plattor och buljonger förvaras i termostatskåp vid 37 °C eller i rumstemperatur. Alla plattor inkuberas minst 2 dygn, svampplattor 14 dygn (försegla plattorna för att förhindra uttorkning), och buljonger 10 dygn.
Kontaktlins och vätska från linsbehållare skall undersökas vid alla kontaktlinskeratiter!
Vid misstanke om Acanthamoeba-keratit placeras skrap- eller biopsimaterialet i rör med Page’s saltlösning och skickas snarast till parasitologiskt laboratorium.
Endoftalmit
Provtagning vid endoftalmit skall göras av ögonläkare!
Ta först konjunktivalodling enligt ovan. Enbart konjunktivalodling har dock litet värde vid diagnostik av endoftalmiter.
Man bör eftersträva att få prov från såväl främre kammaren som glaskroppen. Material aspireras i sprutor som därefter förseglas genom att kanylen sticks in i en steril gummipropp. Snabb transport till laboratoriet där proverna skall kunna tas om hand samma dag! (Om detta inte är möjligt måste den provsättning som beskrivs nedan ske på ögonkliniken.)
På laboratoriet inokuleras material från kammarvätska resp glaskropp på hämatinagar, blodagar (aerob och anaerob), sabouraudagar och i CM-buljong. Plattor odlas minst 2 dygn, svampplattor 14 dygn (förseglade plattor), och buljonger 10 dygn. Preparat för direktmikroskopi erhålls genom att en droppe material får torka på sprittvättade glas. Förutom gramfärgning bör även metylenblåfärgning eller färgning med akridinorange göras.
Övriga ögoninfektioner
Kronisk infektion av canaliculi orsakad av Actinomyces israelii eller Propionibacterium propionicus har beskrivits. Material för anaerobodling kan ofta erhållas på kolad bomullspinne. (Stryk även ut på glas för direktmikroskopi). Skickas snarast till laboratoriet i särskilt transportrör och inokuleras på hämatinagarplatta, sabouraudagarplatta, blodagar-platta (till anaerob odling) samt odlingsbuljong.
ÖVRIG PROVTAGNING
Nasofarynxprov
- Indikation: Varig konjunktivit i synnerhet hos barn. Ögonpåverkan såsom orbital cellulit eller flegmone vid sinuit. Misstanke om klamydiakonjunktivit hos såväl spädbarn, äldre barn och vuxna.
- Teknik och transport: En tunn icke kolad provtagningspinne förs längs näsbottnen till bakre svalgväggen och roteras i ca 5 sek. Pinnen nedförs i transportsubstrat och förvaras i kylskåp i avvaktan på transport.
För C. trachomatis används bomullsarmerad aluminiumpinne utan Ca-alginat som kan störa diagnostiken.
Blododling
- Indikation: Endogen bakteriell endoftalmit och vid exogen endoftalmit med allmänsymtom.
Teknik och transport: Se Referensmetodik bakteriemidiagnostik. SBL, 1993.
Likvor
- Indikation: Endogen endoftalmit med primärinfektion i CNS. Akut retinal nekros.
Teknik och transport: Huden desinficeras noggrant. Låt 1- 5 mL likvor droppa direkt ner i ett sterilt plast- eller glasrör. Provet insänds snarast till laboratoriet. Vid dröjsmål förvaras provet vid 37 °C.
Serologisk diagnostik
Konjunktivalprov, främre kammarprov och glaskroppsprov
