Bilaga 3 (CNS)

Från Referensmetodik för laboratoriediagnostik
Hoppa till navigering Hoppa till sök

Till innehållsförteckningen för Referensmetodik: Infektioner i centrala nervsystemet



Bilaga 3

Detektion av bakterier i direktutstryk: Direkt immunfluorescens

Reagens

oftast lokalt tillverkade.

Fixering av utstryk

  • Lufttorka utstryket på en plan yta,
  • Fixera över låga.
  • Placera alternativt några droppar metanol på objektglaset. Låt ligga 2 min. Låt kvarvarande metanol rinna av utan att skölja och låt utstryket lufttorka igen.

Färgningsprocedur

  • Lägg en droppe av konjugatet på det fixerade utstryket.
  • Lägg därefter detta i fuktig kammare.
  • Inkubera 20 min i 37 °C.
  • Skölj objektglaset ymnigt i PBS.
  • Ställ objektglaset i kyvett med destvatten i 5 min.
  • Ta upp objektglaset och torka försiktigt med filtrerpapper runt preparatet.
  • Lägg på ett täckglas med buffrad glycerol: 1 del PBS pH 7,4 + 9 delar glycerol 87 % p.a.
  • Undersök i fluorescensmikroskop, 40 x 10 förstoring.