Skillnad mellan versioner av "5. Koncentrationsbestämning av flucytosin-svamp"

Från Referensmetodik för laboratoriediagnostik
Hoppa till navigering Hoppa till sök
(Skapade sidan med '''Till innehållsförteckningen för Referensmetodik:Svampinfektioner'' ---- == Bilaga 5 == Kategori:Svampinfektioner')
 
 
Rad 3: Rad 3:
  
 
== Bilaga 5 ==
 
== Bilaga 5 ==
 +
 +
== Flucytosin, koncentrationsbestämning med biologisk metod ==
 +
 +
 +
'''Indikation''' 
 +
*Kontrollera att:
 +
**-Terapeutiskt effektiva nivåer erhålls
 +
**-Toxiska nivåer ej uppnås
 +
 +
'''Princip ''': Med agardiffusionsmetod beräknas den aktiva koncentrationen av Flucytosin (5-Fc) i serum utifrån kända koncentrationer (standard) av samma antibiotikum. En agarplatta med jäststam, känslig för 5-Fc, förses med standard och
 +
patientprov i brunnar.
 +
 +
Plattan inkuberas över natt.
 +
 +
Hämningszonerna runt standarden mäts och sätts mot det logaritmiska värdet för varje koncentration. Det ger en linjär kurva ur vilken patientprovets koncentration kan beräknas.
 +
 +
'''Reagens'''
 +
*YNB-agarplattor 75 mL agar/platta
 +
*Humanserum
 +
*5-Fc standard 200 - 6,25 mg/L spädd i humanserum
 +
*Förvaras i frys -20 °C
 +
*Hållbar 1 år. Får frysas om
 +
*Oberoende kontroll t.ex. 50 mg/L
 +
*McFarland 0,5
 +
*Jäststam ''Candida albicans'' H29
 +
 +
'''Provsättning'''
 +
*-Märk en YNB-agarplatta med C. alb H29 och lab.nr. Så in agarplattan med en suspension av ''C. albicans'' motsvarande McFarland 0,5
 +
*-Täck hela agarytan
 +
*-Sug av överflödet
 +
*-Torka i termostat 35 °C ~ 10 min
 +
*-Stansa hål diam (3 mm) i agarplattan, 4 st hål för standard och 2 st för varje patientprov
 +
*-Märk hålen: 1 st hål för varje standardkoncentration, 2 st hål för varje patientprov och 2 st hål för oberoende kontroll
 +
*- Sätt 10 µL/hål, frys ner resten av serumet
 +
*- Inkubera i 37 °C över natt
 +
*- Mät hämningszonerna runt varje brunn
 +
 +
'''Uträkning'''
 +
*Det logaritmiska värdet på standardens antibiotikakoncentration sätts mot zondiametern så man får en linjär standardkurva.
 +
 +
Ekvationen y = kx + 1 vilken lämpligen är programmerad i en kalkylator.
 +
 +
Mata in standardens och patientprovets zondiametrar i kalkylatorn
 +
 +
 +
'''Prestanda '''
 +
Metodvariation ± 20% för dubbelprov
 +
 +
Mätintervall 6,25 - 200 mg/L
 +
 +
Om patientvärdet är >200 mg/L kan provet spädas i humanserum så att det hamnar inom mätintervallet
 +
 +
'''Referensintervall'''
 +
*Prov före dos ~ 25 mg/L
 +
*Prov efter dos ~ 25 mg/L - 100 mg/L
 
   
 
   
 
[[Kategori:Svampinfektioner]]
 
[[Kategori:Svampinfektioner]]

Nuvarande version från 5 januari 2010 kl. 11.32

Till innehållsförteckningen för Referensmetodik:Svampinfektioner

Bilaga 5[redigera]

Flucytosin, koncentrationsbestämning med biologisk metod[redigera]

Indikation

  • Kontrollera att:
    • -Terapeutiskt effektiva nivåer erhålls
    • -Toxiska nivåer ej uppnås

Princip : Med agardiffusionsmetod beräknas den aktiva koncentrationen av Flucytosin (5-Fc) i serum utifrån kända koncentrationer (standard) av samma antibiotikum. En agarplatta med jäststam, känslig för 5-Fc, förses med standard och patientprov i brunnar.

Plattan inkuberas över natt.

Hämningszonerna runt standarden mäts och sätts mot det logaritmiska värdet för varje koncentration. Det ger en linjär kurva ur vilken patientprovets koncentration kan beräknas.

Reagens

  • YNB-agarplattor 75 mL agar/platta
  • Humanserum
  • 5-Fc standard 200 - 6,25 mg/L spädd i humanserum
  • Förvaras i frys -20 °C
  • Hållbar 1 år. Får frysas om
  • Oberoende kontroll t.ex. 50 mg/L
  • McFarland 0,5
  • Jäststam Candida albicans H29

Provsättning

  • -Märk en YNB-agarplatta med C. alb H29 och lab.nr. Så in agarplattan med en suspension av C. albicans motsvarande McFarland 0,5
  • -Täck hela agarytan
  • -Sug av överflödet
  • -Torka i termostat 35 °C ~ 10 min
  • -Stansa hål diam (3 mm) i agarplattan, 4 st hål för standard och 2 st för varje patientprov
  • -Märk hålen: 1 st hål för varje standardkoncentration, 2 st hål för varje patientprov och 2 st hål för oberoende kontroll
  • - Sätt 10 µL/hål, frys ner resten av serumet
  • - Inkubera i 37 °C över natt
  • - Mät hämningszonerna runt varje brunn

Uträkning

  • Det logaritmiska värdet på standardens antibiotikakoncentration sätts mot zondiametern så man får en linjär standardkurva.

Ekvationen y = kx + 1 vilken lämpligen är programmerad i en kalkylator.

Mata in standardens och patientprovets zondiametrar i kalkylatorn


Prestanda Metodvariation ± 20% för dubbelprov

Mätintervall 6,25 - 200 mg/L

Om patientvärdet är >200 mg/L kan provet spädas i humanserum så att det hamnar inom mätintervallet

Referensintervall

  • Prov före dos ~ 25 mg/L
  • Prov efter dos ~ 25 mg/L - 100 mg/L
Hämtad från "http://referensmetodik.folkhalsomyndigheten.se/index.php?title=5._Koncentrationsbestämning_av_flucytosin-svamp&oldid=5337"