Bilaga 1 (CNS)

Bilaga 1

Initialfärgning

Kristallviolett, stamlösning
- Kristallviolett 100 g
- (Merck art nr 15940)
- Etanol 96 % 750 mL

VARNING! Etanol är brandfarligt.

Kristallviolett brukslösning
- Kristallviolett stamlösning 100 mL
- Ammoniumoxalatlösning 1 % 500 mL
- Renat vatten, ex dest. eller FRO 400 mL
- (FRO=Filtered Reversed Osmosis)

Anvisning:

Brukslösningen filtreras genom filtrerpapper innan den används.

Förvaring: Rumstempertaur

Fixering av utstryk

Lugol, brukslösning
- Jodkristaller puriss 1 g
- Kaliumjodid (pro analysi) 2 g
- Renat vatten, ex dest. eller FRO 300 mL

Anvisning:

Lös jodkristallerna med kaliumjodiden i vatten.

Autoklaveras ej.

Förvaring: Mörk flaska i rumstemperatur

Avfärgning

Acetonsprit
- Aceton (puriss) (KEBO art nr 2. 1015-1) 20 mL
- Etanol (96 %) 80 mL

Förvaring: Rumstemperatur

Som alternativ kan ren etanol (96 %) användas.

VARNING! Mycket brandfarligt.

Kontrastfärg

Karbolfuchsin stamlösning
- Basiskt fuchsin 8g
- Etanol 90% 92 g
- Fenol 90% 50 g
- Renat vatten ad l000g

Hållbarhet: 3 år

Karbolfuchsin, bruksiösning: 10 mL stamlösning blandas med 90 mL renat vatten.

Förvaring: Rumstemperatur

Fixering av utstryk

Lufttorka utstryket på en plan yta.
Fixera över låga.
Placera alternativt några droppar metanol på objektglaset. Låt ligga 2 min. Låt kvarvarande metanol rinna av utan att skölja och låt utstryket lufttorka igen.

Färgningsprocedur

Flöda det fixerade preparatet med kristallviolettlösning. Låt färgen ligga kvar i 30 sek. Häll av kristallviolettlösningen. Skölj bort resterande lösning med Lugols lösning och flöda sedan med mer Lugols lösning. Låt lösningen ligga kvar i 60 sek.
Avfärga genom att låta acetonspriten flöda över utstryket medan objektglaset hålls i lutande vinkel. Sluta när ingen mer färg lossnar. Anpassa avfärgningen till tjockleken på utstryket. Skölj försiktigt bort överflöd av spritenlacetonspriten med kranvatten.
Kontrastfärga genom att hälla på karbolfuchsin 15 sek. Skölj försiktigt bort kontrastfärgen med kranvatten. Torka objektglaset i stående position eller använd en kommersiell objektglastorkare.