Clostridium tetani (diagnostik)
Till falldefinitionen Stelkramp
Till innehållsförteckningen för Referensmetodik: Infektioner i centrala nervsystemet
och
Referensmetodik: Bakteriologisk diagnostik av infektioner i hud, mjukdelar, skelett och inre organ
och
Referensmetodik:Smittskyddslagens sjukdomar
Clostridium tetani
Smittämnet
Clostridium tetani är strikt anaeroba, grampositiva, sporbildande stavar. Stelkrampsbakterien producerar efter autolys ett neurotoxiskt protein (tetanospasmin) som i sin struktur liknar botulinustoxinet. Det syntetiseras som en enkelpeptid (150 000 Da). Genom proteolytisk aktivitet övergår denna i en dubbelkedja (A+B-struktur). Endast en antigen typ är beskriven.
Clostridium tetani är strikt anaeroba, grampositiva, sporbildande stavar. Stelkrampsbakterierna producerar efter autolys ett neurotoxiskt protein (tetanospasmin) som i sin struktur liknar botulinustoxinet. Det syntetiseras som en enkelpeptid (150000 Da). Genom proteolytisk aktivitet övergår denna i en dubbelkedja (A+B-struktur). Endast en antigen typ är beskriven. Toxinets B-enhet binder till gangliosider på motoriska nervcellemas neuron och A-enheten transporteras via axonet till ryggmärgen.
Patogenes och patofysiologi
Toxinets B-enhet binder till gangliosider på de motoriska nervcellernas neuron och A-enheten transporteras via axonet till ryggmärgen. Det blockerar liksom botulinumtoxinet utsöndringen av acetylkolin men binder till synapser i CNS till skillnad från botlinustoxinet som binder perifert. De inhibitoriska impulserna till de motoriska neuronerna resulterar i muskelspasm som kan pågå i veckor.
Symtom och klinisk bild
Stelkramp är ofta associerad med sticksår som initialt kan te sig oskyldiga. Sjukdomen uppträder fr.a. hos ovaccinerade. Patognomont är överkänslighet för ljus och ljud. Den kliniska sjukdomsbilden är dramatisk med muskelspasm och kramper till skillnad från botulism där pareserna är slappa.
Tetanospasmin påverkar i första hand ryggmärgen. Det blockerar liksom botulinumtoxinet utsöndringen av acetylkolin men ger genom att binda till andra typer av synapser upphov till spastiska pareser och kramper.
Epidemiologi
Bakterien och dess sporer kan isoleras från jord och tarminnehåll hos ett stort antal djurarter. Under 5-årsperioden 1997 - 2001 rapporterades åtta fall till SMI enligt smittskyddslagen.
Prevention
Vaccination med tetanustoxoid ingår i det allmänna vaccinationsprogrammet. Boosterdoser ges i samband med djupa förorenade sårskador.
Provtagning och transport
Provtagning är sällan motiverad då den kliniska bilden är typisk. Infektionsfokus kan också vara svårt att identifiera. I övrigt gäller samma rekommendationer som för annan anaerob odling.
Laboratoriediagnostik
Allmänt
Stelkramp är i huvudsak en klinisk diagnos varför frågeställningen är ovanlig på det kliniskt mikrobiologiska laboratoriet. Odling är referensmetodik. Mikroskopi är oftast för okänslig för att påvisa det vanligen låga antalet bakterier.
Stelkramp är i huvudsak en klinisk diagnostik varför frågeställningen är ovanlig på det kliniskt mikrobiologiska laboratoriet.
Referensmetodik
Referenssubstrat
Stelkrampsbakterierna växer på blodagar och vanliga anaerobsubstrat vilka anses vara referenssubstrat (se bilaga 1).
Isolering
Cl. tetani är strikt anaerob. Bakterien växer på blodagar och vanliga anaerobsubstrat. Provmaterialet, oftast från sår, inokuleras på en begränsad del av substratet. Härigenom utnyttjas den kraftiga svärmningen. Redan efter övernattsinkubering kan Cl. tetani renspridas från svärmningskanten. 1 direktpreparat karaktäriseras Cl. tetani av terminala runda sporer (drumstick). Toxinbildningen kan behöva verifieras i musneutralisationstest.
Provmaterialet, oftast från sår, inokuleras på en begränsad del av substratet. Härigenom utnyttjas den kraftiga svärmningen.
Cl. tetani odlas anaerobt i två dygn. Redan efter inkubering över natt kan Cl. tetani renspridas från svärmningskanten.
Identifiering och minimikriterier
I direktpreparat karakteriseras Cl. tetani av terminala runda sporer (drumstick). Slutlig verifiering kan ske med 16S-rRNA-teknik.
Toxinbildningen kan behöva verifieras. Referensmetod är musneutralisationstest.
Alternativ diagnostik
ELISA-teknik finns etablerad för påvisande av tetanusantitoxin. Denna används företrädesvis i seroepidemiologiska studier och vid vaccinprövningar.
Resistensutveckling och resistensbestämning
Resistensbestämning är sällan aktuell.
Epidemiologisk typning
Epidemiologisk typning utförs ej.
Kvalitetskontroll
- Referensstammar:
- Cl. tetani, toxinpositiv: ATCC 19406, NCTC 279, CCUG 4220,
- Cl. tetani, toxinnegativ: NCTC 6336.
- Cl. tetani, toxinpos: CCUG 4220, ATCC 19406, NCTC 279
- Cl. tetani, toxinneg: NCTC 6336
Svarsrutiner
Växt av/Ingen växt av Clostridium tetani.
Laboratorierapportering
Stelkramp är anmälningspliktig enligt smittskyddsförordningen (2004:255) för behandlande läkare.
Stelkramp är anmälningspliktig enligt smittskyddslagen Grupp A.1 Andra anmälningspliktiga sjukdomar.