PAR 07"Skin-snip"-provtagning och pÄvisning av mikrofilarier i hud

Hoppa till: navigering, sök

Huvudartikel, publicerad i mars 2012.


Till innehÄllsförteckningen för Referensmetodik:Parasitologisk diagnostik


"SKIN SNIP"- provtagning och pÄvisning av mikrofilarier i hud.

Modifierad efter metod upprÀttad av Helena Hellqvist och Ulf Bronner (publicerad pÄ Svenska LÀkaresÀllskapets referensgrupp för parasitologis hemsida). http://www3.svls.se/sektioner/tm/SKIN%20SNIP.htm

Analysprincip

Mikroskopisk pĂ„visning av levande mikrofilarier som aktivt rör sig ut frĂ„n ett ”skin snip”.

Speciell utrustning

Mikroskop med kalibrerat mÀtokular

Provtagning

Provtagning ska ske frĂ„n huden över skulderbladen, höftbenskammen och vaderna samt frĂ„n andra omrĂ„den av huden dĂ€r patienten har symtom (dermatit, rodnad). NĂ€r mikrofilarierna dör efter 0,5–2 Ă„r orsakar de kraftig klĂ„da, varför provtagning enbart frĂ„n hudpartier med klĂ„da kan ge falskt negativt utslag dĂ„ mikrofilarierna dĂ€r inte lĂ€ngre Ă€r rörliga. Det Ă€r sĂ„ledes av vikt att ta "skin snip" frĂ„n de angivna standardiserade lokalerna. Ta en cirka 1 mm djup "skin snip" genom att lyfta upp huden med en nĂ„l och skĂ€r av en ytlig bit, ca 2 x 2 mm, med ett skalpellblad. Var noga med att inte orsaka blödning – ta alltsĂ„ INTE en vanlig stansbiopsi – och lĂ€gg INTE lokalbedövning som pĂ„verkar mikrofilariernas rörlighet. Ta flera "skin snip" – minst 6 st.

Analysmetod

Placera "skin snip"-provet pĂ„ ett objektsglas, tillsĂ€tt en droppe NaCl och lĂ€gg pĂ„ ett tĂ€ckglas. Observera att provet inte fĂ„r torka ut – placera objektsglaset exempelvis i en fuktkammare. Om provet inte kan undersökas direkt pĂ„ mottagningen rekommenderas transport i ett litet sterilt rör med en mindre mĂ€ngd NaCl sĂ„ det tĂ€cker provmaterialet och förhindrar intorkning. Provet ska förvaras i rumstemperatur och bör omgĂ„ende transporteras till ett parasitologiskt laboratorium. Kontakta personal pĂ„ laboratoriet i god tid innan provtagning.

AvlÀsning

Undersök provet efter 30 min till 3 timmar i mikroskop med lÄg förstoring (10x eller 40x-objektiv) för mikrofilarier som ses aktivt röra sig ut ur hudbiten. Om mikrofilarier inte pÄvisas vid en första analys rekommenderas förnyad undersökning nÀsta dag. Provet bör dÄ förvaras i inkubator i 37° C eller i rumstemperatur under natten och ÄtgÀrder vidtas för att förhindra intorkning (t.ex. placera preparatet i en fuktkammare). Vid fynd av mikrofilarier görs Giemsa-fÀrgning (PAR 09 ). För artbestÀmning se referens 1.

Tolkning av resultat

Falskt negativt svar kan bero pÄ felaktigt valt provtagningsstÀlle. Det Àr viktigt att göra artbestÀmning vid mikroskoperingen. Förutom Onchocerca volvulus kan tvÄ andra mikrofilarier Äterfinnas i huden:

  • Mansonella streptocerca vars mikrofilarier rör sig lĂ„ngsammare Ă€n O. volvolus och har en typisk krokform. Streptocerciasis finns i VĂ€st- och Centralafrika och förorsakar en kliande dermatit framför allt över bĂ„l- och skulderregionen.
  • Mansonella ozzardi finns i Karibien och Syd- och Centralamerika och kan bl.a. ge upphov till kliande hudförĂ€ndringar. Mikrofilarierna Ă€r korta med en lĂ„ng smal svans och kan ses i hud och subkutan vĂ€vnad men Ă€ven i perifert blod.

KvalitetssÀkring

För lÀmpligt bildmaterial se referens 1.

Svarsrutiner

Mikrofilarier pÄvisade (ange genus och art).

Mikrofilarier inte pÄvisade.

LitteraturhÀnvisningar

1. Bench aids for the diagnosis of filarial infections. World Health Organization 1997, Geneva, Switzerland.

2. Whitworth J. Diagnosis of onchocerciasis. In: Cox FEG, Kreier JP, Wakelin D, editors. Topley & Wilson’s Microbiology and microbial infections, volume 5 Parasitology, 9th ed. London: Arnold; 1998. p 628-629.

3. Ash L, Orihel T. Atlas of Human Parasitology. ASCP Press, Chicago.