Grampositiva bakterier vid UVI-diagnostik
Till innehållsförteckningen för Referensmetodik: Urinvägsinfektioner/bakteriuri, 2:a upplagan 2000
Bakgrund Referensgruppen har sammanställt ett förslag till artbestämning av urinisolat i rutindiagnostik. Det bygger på att utodling sker på CLED- och blodagar. Förslaget utgår från arbeten utgivna av Referensgrupperna för Enterobacteriaceae, stafylokockdiagnostik och till viss del Referensgruppen för glukosnonfermentativa gramnegativa stavar.
Syftet är att ange minimikriterier för positiva fynd och användbara tilläggskriterier vid UVI-diagnostik.
Grampositiva bakterier
Stafylokocker
- grampositiva, katalaspositiva kocker i klasar. Behöver rutinmässigt endast indelas i tre grupper:
- S. saprophyticus
- S. aureus
- övriga koagulasnegativa stafylokocker (KNS).
1. S. saprophyticus
Minimikriterier: typisk kolonimorfologi, DNasnegativ*, novobiocinresistent, zon< 16 mm med 5μg lapp.
Andra egenskaper:
- typisk kolonimorfologi: porslinsvita till benvita kolonier på blodagar, gulaktiga på CLED-agar.
- koagulasnegativ.
- vanligen känslig för ampicillin, cefalosporiner och trimetoprim; in vitro resistent mot mecillinam.
- stammar med avvikande resistensmönster bör typas ytterligare innan de identifieras som
S. saprophyticus.
2. S. aureus
Minimikriterier: typisk kolonimorfologi, DNas-positiv eller positiv i agglutinationstest för S. aureus.
Andra egenskaper:
- kolonimorfologi: större och mer jämnstora kolonier än koagulasnegativa stafylokocker, oftast gult pigment på CLED- och blodagar.
- koagulaspositiv (referensmetod).
3. Övriga koagulasnegativa stafylokocker (KNS)
Minimikriterier: stafylokocker, ej S. aureus, novobiocinkänsliga.
Rörkoagulas med kaninplasma är referensmetod och bör användas om DNas eller agglutinationstest ger svårtolkade resultat.
DNas-test rekommenderas för screening av urinisolat, latexagglutinationstest är mindre lämpliga eftersom även S. saprophyticus ofta ger agglutination. Vissa koagulasnegativa stafylokocker bildar DNas. I praktiken renstryks en koloni till blodagar med novobiocinlapp och till DNA-agar.
Enterococcus spp och Streptokocker
Grampositiva kocker i kedjor, katalasnegativa.
1. Enterococcus spp
Minimikriterier: typisk kolonimorfologi, galla-eskulin positiv eller positiv i agglutinationstest för grupp D.
Andra egenskaper:
- gråvita kolonier på blodagar, kan ha ingen hemolys, alfa- eller betahemolys, oftast gula kolonier på CLED-agar.
- växer i buljong med 6,5% NaCl.
- arabinosfermentation kan användas för att skilja Enterococcus faecium (positiv) från Enterococcus faecalis (negativ).
- Nedsatt känslighet för cefalosporin.
2. Grupp B streptokocker (GBS)
Minimikriterier: typisk kolonimorfologi, positiva i agglutinationstest för grupp B eller positivt CAMP-test.
Andra egenskaper:
- små ofärgade kolonier på CLED-agar, syns ibland först efter 2 dygns inkubering. På blod blå/gråvita kolonier med smal zon betahemolys, ibland alfahemolys eller ingen hemolys.
- Känsliga för cefalosponn.
3. Övriga betahemolytiska streptokocker
Minimikriterier: typisk kolonimorfologi, betahemolyserande, positiva i agglutinationstest för respektive grupp.
Andra egenskaper:
- växer oftast dåligt på CLED-agar, betahemolys på blod.
4. Alfastreptokocker
Minimikriterier: typisk kolonimorfologi, alfahemolyserande, grampositiva kocker i kedjor.
Andra egenskaper:
- små eller inga kolonier på CLED-agar, alfahemolys på blod.
- optochin 14 mm.
Lactobacillus spp
Minimikriterier: typisk kolonimorfologi, grampositiva stavar med typiskt utseende, katalasnegativ.
Andra egenskaper:
- små eller inga kolonier på CLED-agar, ibland laktospositiv.
- ofta alfahemolys på blod.
- mikroskopi: grampositiva (ibland gramlabila) långa eller korta, ofta regelbundet formade stavar.
Bacillus spp
Minimikriterier: typisk kolonimorfologi, grampositiva stavar.
Andra egenskaper:
- oftast stora torra kolonier med hemolys på blod, kan ibland förväxlas med Enterobacteriaceae eller pseudomonas.
- katalaspositiv, oxidas positiv/negativ.
- mikroskopi: regelbundna, stora, grampositiva eller gramlabila stavar ibland med synliga sporer.
Corynebacterium urealyticum
Minimikriterier: typiskt koloniutseende, grampositiv, kort stav, katalaspositiv, snabbt ureaspositiv. Diagnosen kan vid tveksamhet verifieras med API Coryne.
Andra egenskaper:
- långsamväxande, små glansiga kolonier på blodagar.
- oftast mycket antibiotikaresistent.
Corynebacterium urealyticum kan vara kliniskt relevant. Gör ureastest. OBS! Ovanstående kriterier utesluter ej Listeria.
"Difteroida" stavar
Minimikriterier: typisk kolonimorfologi, grampositiva stavar med typiskt utseende.
Andra egenskaper:
- ofta svag växt på CLED-agar.
- mikroskopi: grampositiva stavar, ofta kägelformade, ligger i V-formationer och palissader.
- katalaspositiv.
Corynebacterium urealyticum kan vara kliniskt relevant. Gör ureastest. OBS! Ovanstående kriterier utesluter ej Listeria.