Skillnad mellan versioner av "Provsättning"

Från Referensmetodik för laboratoriediagnostik
Hoppa till navigering Hoppa till sök
(Skapade sidan med '''Till innehållsförteckngen för Referensmetodik: Bakteriologisk diagnostik av infektioner i hud, mjukdelar, skelett och inre organ'' ---- '''EJ redigerad''' == Provtagnin…')
 
 
(12 mellanliggande sidversioner av samma användare visas inte)
Rad 2: Rad 2:
  
 
----
 
----
−
'''EJ redigerad'''
 
−
== Provtagning-allmänt ==
 
  
 +
== Ankomstkontroll på laboratoriet ==
  
 +
*Kontrollera;
 +
**att provkärlens/objektglasens märkning och antal överensstämmer med remiss.
 +
**att beställare finns angivet.
 +
**att rekommenderat provmaterial tagits till undersökningen.
 +
**att rekommenderad transporttid ej överskridits.
  
−
=== Märkning av prov och remiss ===
+
Avvikelser från ovanstående bör föranleda diskussion med beställaren. Om behandlande läkare anser nytt prov inte kan tas och att analysen ska utföras och rapporteras trots felaktigheter på det inkommande provet, ska felkällorna kommenteras i laboratorierapporten.
  
−
Stor noggrannhet krävs vid märkning av prov och remiss. Socialstyrelsen har för att förhindra förväxlingar utarbetat nedanstående författningar:
 
  
−
*SOSFS 1989:1 Åtgärder för att förhindra förväxlingar inom hälso- och sjukvården
+
== Provsättning ==
  
−
Från denna författning har nedanstående citat hämtats (vår kursivering):
 
  
−
*-”Väsentligt för säkerheten är också tillfredsställande rutiner för märkning av röntgenfilmer, laboratorieprov och i förekommande fall läkemedel.”
 
−
*-”För att minimera säkerhetsrisker av ovan nämnd karaktär föreskriver Socialstyrelsen, att föreskrifter i dessa avseenden skall finnas vid sjukvårdsinrättningarna. Då i övrigt betydande skillnader i lokal organisation kan föreligga är det av vikt att föreskrifterna utfärdas lokalt av vederbörande ansvarig klinik¬chef/motsvarande. Dessa bör dock i möjligaste mån utformas enhetligt inom ett sjukvårdsområde. De bör därför fastställas av sjukvårdsstyrelse eller direktion såvida de inte avser ett begränsat verksamhetsområde.”
 
−
-”Lokala föreskrifter av angivet slag skall upprättas med iakttagande av Social¬sty¬relsens nedanstående föreskrifter. Dessa behandlar dock inte kliniskt kemisk och bakteriologisk verksamhet m.m. Provtagning och provhantering måste gi¬vetvis även inom dessa områden ske på sådant sätt att risk för förväxling elimi¬neras så långt som möjligt. Vid utformningen av lokala rutiner och före¬skrifter härför skall i tillämpliga delar beaktas Socialstyrelsens föreskrifter (1984:27) om blodgivning, blodtransfusion m.m.”
 
−
-”Oidentifierad patient. Vid intagning av patient, vars identitet inte kan faststäl¬las eller i fråga om vilken erhållna uppgifter är osäkra eller ofullständiga, skall namn och personnummer ersättas med löpnummer. Nummerbeteckningen måste anges i samtliga patientens handlingar samt på etiketter till provrör och annat materiel som är hänförligt till patienten”.
 
−
-”Även objektglas bör märkas med så fullständiga identitetshandlingar som möj¬ligt. Det kan emellertid av utrymmesskäl vara nödvändigt att utelämna vissa mar¬keringar. Ett minimikrav bör dock vara att glasen förses med patientens födelse¬nummer och initialer.”
 
−
-”Vid provets ankomst till det laboratorium  som skall utföra undersökningen skall provkärlens/objektglasens märkning och antal kontrolleras mot remissen.”
 
−
-”Efter förlossningen kommer modern att vara försedd med ett band för egen iden¬titet och ett band för varje levande barn. Det nyfödda barnets identitets¬nummer skall finnas angivet i samtliga handlingar som rör barnet under dess vistelse på förlossnings- och BB-avdelning.”
 
−
SOSFS 1989:38 Blodgivning, blodtransfusion (ersätter 1984:27)
 
−
Från denna författning har nedanstående citat hämtats (vår kursivering):
 
−
- ”Det är av största vikt att betryggande rutiner utarbetas för identifiering av pati¬enten vid provtagning.”
 
−
-”Etikettering får inte ske efter provtagningen. Lossnar etiketten från provtag¬nings¬röret sedan provet tagits, skall provet kasseras.”
 
−
-”I direkt samband med provtagningen kontrolleras att provtagningsrörets eti¬kett och remissen innehåller korrekta identitetsuppgifter.”
 
−
-”Gällande föreskrifter för kontroll av patientens identitet i samband med prov¬tagning måste noggrant följas även i dessa situationer. Beträffande oidentifierade patienter gäller särskilda föreskrifter (SOSFS 1989:1).”
 
  
−
Analysbeställning/remiss
+
=== Allmän odling, referensmetodik ===
−
Remissen bör innefatta information om:
 
−
• relevant anamnes, diagnos och uppkomstmekanism till infektionen, antingen i form av klartext eller som ICD-10 kod.
 
−
• eventuell antimikrobiell behandling (genomgången, pågående, planerad).
 
−
• specificerat anatomiskt provtagningsställe (enbart sår räcker t.ex. inte).
 
−
• typ av provmaterial (pus, biopsier etc.).
 
−
• önskad analys inklusive speciella analyser alternativt konsulta¬tion/frågeställning till den kliniske bakteriologen.
 
−
• provtagningstidpunkt.
 
−
• beställare av analysen (läkare, klinik och adress).
 
−
• spårbara patientdata.
 
−
Förutsättningar
 
−
Prov ska tas enligt laboratoriets anvisningar av personal med adekvat kunskap.
 
−
Val av provtagningsmateriel
 
−
Se Provtagning, klinisk del.
 
−
Val av komponent vid analysbeställning
 
−
Remissen till det bakteriologiska laboratoriet ska utformas så att remitterande läkare kan välja:
 
  
−
• önskad analys inklusive speciella analyser alternativt
 
−
• konsultation/frågeställning till den kliniske bakteriologen.
 
  
−
Förberedelser
+
'''1. Aerob odling'''
−
Ta fram provtagnings-/transportmaterial och remiss. Observera att remiss och provtagnings-/transportmaterial endast får finnas framdukat för den patient som provtagningen gäller!
 
  
−
Märkning
+
Alla typer av prov, definierade i tabell 6, odlas primärt på blodagar, hematinagar och CLED-agar. I förekommande fall sätts prov också till anrikningsbuljong, FAB. Prov som anländer till laboratoriet i blododlingsflaskor, inkuberas upp till 10 dygn och sekundärsprids närhelst indikation till växt föreligger. Sådana prov som utgörs av fast vävnad etc., vilka överförs till anrikningsbuljong, sekundärsprids på agarplattor av samma sort. Buljongen inkuberas totalt 10 dygn.
−
Fyll i remissen med uppgifter enligt Märkning av prov och remiss, samt Analys¬be¬ställning/remiss.
 
−
Märk provtagnings-/transportmaterial med data spårbara mot remiss.
 
−
Godkända undantag:
 
−
• Objektglas. Av utrymmesskäl godkänns märkning med patientens födelse¬nummer och initialer på objektglas.
 
−
• Okänt personnummer. Remisser ska märkas med födelseår, mån, dag samt namn. Märk provtagnings-/transportmaterial med data spårbara mot remiss.
 
−
• Nyfödda. Remisser ska märkas med efternamn, kön, födelseår, mån, dag samt ID-nummer enligt ID-band. Märk provtagnings-/transportmaterial med data spårbara mot remiss.
 
−
• Oidentifierad patient. Remisser ska märkas med löpnummer samt ID-num¬mer enligt ID-band. Märk provtagnings-/transport-material med data spår¬bara mot remiss.
 
  
 +
'''2. Anaerob odling, rutinnivå'''
  
−
=== Utförande ===
+
Metoden avser miniminivå för anaerob odling som i förekommande fall kompletterar aerob odling, se också tabell 6, fotnot 4. Prov inokuleras på anaeroba blodplattor, FAA (se nedan), som görs '''semiselektiva''' genom applikation av aminoglykosid- och metronidazollappar i primärstryket (se tabell 6, fotnot 5). Inokulera även anaerob buljong (FAB) som inkuberas aerobt eller anaerobt.
 +
 +
De anaeroba blodplattorna bör vara prereducerade eller färska. Inokulering sker i anaerobbox (referensmetod), men aerob provsättning med sekundär inkubering i klocka med gasgenererande kuvert som t.ex. Anaerogen (OXOID) eller i klocka med evakueringssystem är accepterad alternativ metodik. Med kuvert erhålls god anaerobios tillräcklig för flertalet kliniskt relevanta anaeroba bakterier. Med resazurin som indikator garanteras redoxförhållanden ≤ 110 mV. Avläs dag 2 eller efter medicinsk bedömning. Observera att anaerobt inkuberade plattor inte bör exponeras för luft under de första 48 timmarna. Vissa långsamväxande arter, hit hör peptostreptokocker och svartpigmenterade gramnegativa stavar som ''Porphyromonas, Prevotella'', och ''Bilophila'' kan behöva inkuberas ytterligare en eller flera dagar för detekterbara kolonier. Andra anaeroba bakterier, t.ex. ''Actinomyces'' kan behöva 7-10 dagars inkubationstid. FAB granskas för växt dagligen upp till 10 dygn.
  
−
Märkning och provtagning ska ske i en seans.
+
Den förenklade anaeroba odlingen är med beskrivna förbehåll fullt acceptabel i rutindiagnostiken. Det enskilda laboratoriet definierar utifrån denna miniminivå eventuell modifiering av anaerobdiagnostiken, innefattande förlängd inkuberings¬tid, bruk av selektiva medier (se nedan), särskilt i de fall anaerob odling speciellt begärts.
−
• Ta fram och märk remiss samt rekommenderat provtagnings-/transportmaterial (se Provtagning, praktiskt utförande).
+
 
−
• Kontrollera patientens identitet.
+
'''3. Anaerob odling, jämförelsenivå'''
−
• Ta prov. Kontrollera att uppgifterna på remiss och provtagnings-/transport- material överensstämmer i anslutning till provtagningen.
+
 
−
• Förslut provtagnings-/transportmaterial och placera detta och remissen så att sammanblandning inte kan ske med andra prov.
+
Metoden bör användas vid studier men kan även användas i rutinen efter särskild medicinsk bedömning. Prov inokuleras på prereducerade eller färska anaeroba blodagarplattor, d.v.s. FAA, samt två typer av selektiva FAA; kana-vanko-agar och neomycinagar (enligt bilaga 1). Inokulera även anaerob buljong (FAB) i förekommande fall och inkubera denna anaerobt.
−
• Ange provtagningstidpunkt och datum på remissen.
+
För anaerob miljö används anaerobbox i vilken all hantering av provet sker (miljö 10 % H2, 5-10% CO<SUB>2</SUB>, 80-85 % N2. Alternativ är inkubering i någon typ av klocka (se under punkt 2).
−
• Provtagaren ska signera remissen.  
+
−
• Packa prov enligt gällande föreskrifter, se SMIs hemsida.
+
Inkubera anaeroba plattor och eventuell buljong 10 dygn. Daglig avläsning.
−
• Transportera prov till laboratoriet. Alla prov ska transporteras så snart som möjligt till laboratoriet. Om det inte kan ske ska nedanstående riktlinjer an¬vändas för förvaring och transport. Prov för bakteriologisk odling bör nå labo¬ratoriet inom 24 timmar.
+
 
 +
=== Speciell odling, referensmetodik ===
 +
 +
=== Tabell 6 ===
 +
[[Fil:Hudochmjuktabell6.jpg]]
 +
[[Fil:Hudochmjuktabell6b.jpg]]
 +
 
 +
=== Tabell 7.  ===
 +
Val av medier, atmosfär, temperatur och inkubationstid beskrivs i tabell 7.
 +
[[Fil:Hudochmjuktabell7a.jpg]]
 +
 
 +
== Inokulering av medier ==
 +
 
 +
 
 +
 
 +
=== Allmänt ===
 +
 
 +
Inokulera alltid medier i en bestämd ordning med det minst selektiva mediet först. Provmaterialet kan kastas en vecka efter att provet primärodlats, eller efter medicinsk bedömning. Lämpliga metoder för provapplikation på agarplattor beskrivs i figur 7 och 8. Märk först agarplattorna med Labnr och inokuleringsdatum. Primärstryk i förekommande fall med provtagningspinne (fig 7) eller applicera ca 100 mikroL material på plattan (fig 8).
 +
 
 +
 
 +
[[Fil:Hudochmjukfigur7.jpg]] 
 +
 
 +
Gör först ett rakt primärstryk. Stryk sedan vinkelrätt mot detta första stryk. Rotera pinnen under hela stryket. Återställ provtagningspinnen i transportröret. Sekundärstryk med plastinös enligt 2 och 3.
 +
 
 +
 
 +
 
 +
[[Fil:Hudochmjukfigur8.jpg]]
 +
 
 +
Primärstryk agarplattorna med plastinös enligt 1. Stryk först ett rakt stryk. Stryk sedan vinkelrätt mot detta första stryk. Sekundärstryk med plastinös enligt 2 och 3.
 +
 +
 
 +
=== Inokulering av flytande medier ===
 +
 
 +
Märk buljongrör med Labnr och inokuleringsdatum.
 +
 
 +
Ta provmaterial med engångs plastpipett/sterila instrument och inokulera mediet.
 +
 
 +
 
 +
=== Direktmikroskopi ===
 +
 
 +
Märk objektglas med Labnr.
 +
 
 +
Ta provmaterial med engångs plastpipett/sterila instrument och stryk på objektglaset.
 +
 
 +
 
 +
== Provmaterialrelaterad beskrivning ==
 +
 
 +
 
 +
=== Allmän odling ===
 +
 
 +
'''Sekret pinnprov i transportrör'''
 +
 
 +
* Öppna transportröret och ta ut provtagningspinnen.
 +
*Inokulera och inkubera medier.
 +
 
 +
'''Sekret i anaerob transportflaska eller sterilt rör/kärl'''
 +
* Homogenisera innehållet genom att vortexa eller vända det förslutna röret några gånger.
 +
*Öppna röret och ta material med engångs plastpipett. Förslut röret.
 +
*Inokulera och inkubera medier. Gör anaerob odling först.
 +
 
 +
'''Vävnad i sterilt rör/kärl'''
 +
* Öppna röret och ta material.
 +
*Placera materialet i steril mortel.
 +
*Homogenisera materialet i steril mortel. Tillsätt lite FA-buljong om provet är torrt.
 +
*Inokulera och inkubera medier. Gör anaerob odling först.
 +
'''Vävnad i FA-buljong med tecken på växt vid ankomst'''
 +
* Vortexa eller vänd det förslutna röret några gånger.
 +
*Öppna röret och ta material med engångs plastpipett. Förslut röret.
 +
*Inokulera och inkubera medier. Gör anaerob odling först.
 +
'''Vävnad i FA-buljong utan tecken på växt vid ankomst'''
 +
* Inkubera röret.
 +
*Inokulera och inkubera medier vid tecken på växt. Vid tveksamhet om växt är det lämpligt att gramfärga buljongen samt subkultivera till agarplattor.
 +
 
 +
'''Ej kroppseget material i FA-buljong'''
 +
* Inkubera i 10 dygn i 35 °C - 37 °C.
 +
*Inokulera och inkubera medier vid tecken på växt. Vid tveksamhet om växt är det lämpligt att gramfärga buljongen samt subkultivera till agarplattor.
 +
'''Ej kroppseget material i sterilt rör/kärl med förväntad monomikrobiell floratyp'''
 +
* Öppna röret och placera materialet i FA-buljong.
 +
*Inkubera i 10 dygn i 35 °C - 37 °C.
 +
*Vid växt ta material från buljongröret. Inokulera och inkubera medier.
 +
 
 +
'''Ej kroppseget material i sterilt rör/kärl med förväntad polymikrobiell flora¬typ (spiral, dränage)'''
 +
* Placera under anaeroba och sterila betingelser.
 +
** spiralen i steril petriskål och tillsätt FA-buljong. Skaka försiktigt.
 +
** alternativt i FA-buljongrör och vortexa.
 +
*Inokulera medier med hjälp av plastpasteurpipett. Gör anaerob odling först.
 +
'''Blododlingsflaskor med tecken på växt vid ankomst'''
 +
* Odla ut vid ankomsten.  
 +
*Inokulera och inkubera medier.
 +
*Tillsätt näringssubstrat enligt tillverkarens anvisningar.
 +
*Inkubera flaskorna ett dygn i 36 °C innan eventuell ny utodling (eller tills blod¬odlingssystemet signalerar).
 +
*Om det växer rikligt på direktutodlade medier behöver provet inte odlas ut igen.
 +
'''Blododlingsflaskor utan tecken på växt vid ankomst'''
 +
* Tillsätt näringssubstrat enligt tillverkarens anvisningar.
 +
Inkubera flaskorna i 36 °C och avläs i fem dygn (eller tills blododlingssystemet signalerar) innan eventuell utodling.
 +
Inokulera och inkubera medier.
 +
 
 +
'''CAPD (PD), dialysvätska'''
 +
* Desinficera dialyspåsen.  
 +
*Aspirera 100 mL dialysvätska och sätt till 2st 50 mL centrifugrör.
 +
*Centrifugera båda rören i 2000 x g, 10 min.
 +
*Sug av ovanvätskan med steril engångspipett av plast. Kasta ovanvätskan. Om endast liten mängd sediment, lämna kvar totalt ca 2 mL i röret för utodling.
 +
*Inokulera från sedimentet: 0,1 mL/agarplatta samt 0,5 mL till anrikningsbuljong.
 +
*Lägg ev. material på ett märkt objektsglas för direktmikroskopi.
 +
*Om blododlingsflaskor eventuellt använts, åtgärdas de enligt ovan.
 +
 
 +
 
 +
=== Speciell odling ===
 +
 
 +
'''GBS-odling'''
 +
*Inokulera provtagningspinnarna från vagina respektive rektum tillsammans i anrikningsbuljong för grupp B streptokocker, ”GBS-buljong”.
 +
*Inkubera buljongen i 1 dygn 35 o-37 °C.
 +
*Inokulera en fårblodagarplatta med den inkuberade buljongen.
 +
*Inkubera plattan i 35 °C -37 °C . Avläs efter 1 dygn. Om ingen växt av GBS, reinkubera agarplattan 1 dygn .
 +
 
 +
 +
[[Kategori:Laboratoriediagnostik-Infektioner i hud och mjukdelar]]
 
[[Kategori:Infektioner i hud, mjukdelar, skelett och inre organ]]
 
[[Kategori:Infektioner i hud, mjukdelar, skelett och inre organ]]

Nuvarande version från 13 december 2009 kl. 15.49

Till innehållsförteckngen för Referensmetodik: Bakteriologisk diagnostik av infektioner i hud, mjukdelar, skelett och inre organ

Ankomstkontroll på laboratoriet[redigera]

  • Kontrollera;
    • att provkärlens/objektglasens märkning och antal överensstämmer med remiss.
    • att beställare finns angivet.
    • att rekommenderat provmaterial tagits till undersökningen.
    • att rekommenderad transporttid ej överskridits.

Avvikelser från ovanstående bör föranleda diskussion med beställaren. Om behandlande läkare anser nytt prov inte kan tas och att analysen ska utföras och rapporteras trots felaktigheter på det inkommande provet, ska felkällorna kommenteras i laboratorierapporten.


Provsättning[redigera]

Allmän odling, referensmetodik[redigera]

1. Aerob odling

Alla typer av prov, definierade i tabell 6, odlas primärt på blodagar, hematinagar och CLED-agar. I förekommande fall sätts prov också till anrikningsbuljong, FAB. Prov som anländer till laboratoriet i blododlingsflaskor, inkuberas upp till 10 dygn och sekundärsprids närhelst indikation till växt föreligger. Sådana prov som utgörs av fast vävnad etc., vilka överförs till anrikningsbuljong, sekundärsprids på agarplattor av samma sort. Buljongen inkuberas totalt 10 dygn.

2. Anaerob odling, rutinnivå

Metoden avser miniminivå för anaerob odling som i förekommande fall kompletterar aerob odling, se också tabell 6, fotnot 4. Prov inokuleras på anaeroba blodplattor, FAA (se nedan), som görs semiselektiva genom applikation av aminoglykosid- och metronidazollappar i primärstryket (se tabell 6, fotnot 5). Inokulera även anaerob buljong (FAB) som inkuberas aerobt eller anaerobt.

De anaeroba blodplattorna bör vara prereducerade eller färska. Inokulering sker i anaerobbox (referensmetod), men aerob provsättning med sekundär inkubering i klocka med gasgenererande kuvert som t.ex. Anaerogen (OXOID) eller i klocka med evakueringssystem är accepterad alternativ metodik. Med kuvert erhålls god anaerobios tillräcklig för flertalet kliniskt relevanta anaeroba bakterier. Med resazurin som indikator garanteras redoxförhållanden ≤ 110 mV. Avläs dag 2 eller efter medicinsk bedömning. Observera att anaerobt inkuberade plattor inte bör exponeras för luft under de första 48 timmarna. Vissa långsamväxande arter, hit hör peptostreptokocker och svartpigmenterade gramnegativa stavar som Porphyromonas, Prevotella, och Bilophila kan behöva inkuberas ytterligare en eller flera dagar för detekterbara kolonier. Andra anaeroba bakterier, t.ex. Actinomyces kan behöva 7-10 dagars inkubationstid. FAB granskas för växt dagligen upp till 10 dygn.

Den förenklade anaeroba odlingen är med beskrivna förbehåll fullt acceptabel i rutindiagnostiken. Det enskilda laboratoriet definierar utifrån denna miniminivå eventuell modifiering av anaerobdiagnostiken, innefattande förlängd inkuberings¬tid, bruk av selektiva medier (se nedan), särskilt i de fall anaerob odling speciellt begärts.

3. Anaerob odling, jämförelsenivå

Metoden bör användas vid studier men kan även användas i rutinen efter särskild medicinsk bedömning. Prov inokuleras på prereducerade eller färska anaeroba blodagarplattor, d.v.s. FAA, samt två typer av selektiva FAA; kana-vanko-agar och neomycinagar (enligt bilaga 1). Inokulera även anaerob buljong (FAB) i förekommande fall och inkubera denna anaerobt. För anaerob miljö används anaerobbox i vilken all hantering av provet sker (miljö 10 % H2, 5-10% CO2, 80-85 % N2. Alternativ är inkubering i någon typ av klocka (se under punkt 2).

Inkubera anaeroba plattor och eventuell buljong 10 dygn. Daglig avläsning.

Speciell odling, referensmetodik[redigera]

Tabell 6[redigera]

Hudochmjuktabell6.jpg Hudochmjuktabell6b.jpg

Tabell 7.[redigera]

Val av medier, atmosfär, temperatur och inkubationstid beskrivs i tabell 7. Hudochmjuktabell7a.jpg

Inokulering av medier[redigera]

Allmänt[redigera]

Inokulera alltid medier i en bestämd ordning med det minst selektiva mediet först. Provmaterialet kan kastas en vecka efter att provet primärodlats, eller efter medicinsk bedömning. Lämpliga metoder för provapplikation på agarplattor beskrivs i figur 7 och 8. Märk först agarplattorna med Labnr och inokuleringsdatum. Primärstryk i förekommande fall med provtagningspinne (fig 7) eller applicera ca 100 mikroL material på plattan (fig 8).


Hudochmjukfigur7.jpg

Gör först ett rakt primärstryk. Stryk sedan vinkelrätt mot detta första stryk. Rotera pinnen under hela stryket. Återställ provtagningspinnen i transportröret. Sekundärstryk med plastinös enligt 2 och 3.


Hudochmjukfigur8.jpg

Primärstryk agarplattorna med plastinös enligt 1. Stryk först ett rakt stryk. Stryk sedan vinkelrätt mot detta första stryk. Sekundärstryk med plastinös enligt 2 och 3.


Inokulering av flytande medier[redigera]

Märk buljongrör med Labnr och inokuleringsdatum.

Ta provmaterial med engångs plastpipett/sterila instrument och inokulera mediet.


Direktmikroskopi[redigera]

Märk objektglas med Labnr.

Ta provmaterial med engångs plastpipett/sterila instrument och stryk på objektglaset.


Provmaterialrelaterad beskrivning[redigera]

Allmän odling[redigera]

Sekret pinnprov i transportrör

  • Öppna transportröret och ta ut provtagningspinnen.
  • Inokulera och inkubera medier.

Sekret i anaerob transportflaska eller sterilt rör/kärl

  • Homogenisera innehållet genom att vortexa eller vända det förslutna röret några gånger.
  • Öppna röret och ta material med engångs plastpipett. Förslut röret.
  • Inokulera och inkubera medier. Gör anaerob odling först.

Vävnad i sterilt rör/kärl

  • Öppna röret och ta material.
  • Placera materialet i steril mortel.
  • Homogenisera materialet i steril mortel. Tillsätt lite FA-buljong om provet är torrt.
  • Inokulera och inkubera medier. Gör anaerob odling först.

Vävnad i FA-buljong med tecken på växt vid ankomst

  • Vortexa eller vänd det förslutna röret några gånger.
  • Öppna röret och ta material med engångs plastpipett. Förslut röret.
  • Inokulera och inkubera medier. Gör anaerob odling först.

Vävnad i FA-buljong utan tecken på växt vid ankomst

  • Inkubera röret.
  • Inokulera och inkubera medier vid tecken på växt. Vid tveksamhet om växt är det lämpligt att gramfärga buljongen samt subkultivera till agarplattor.

Ej kroppseget material i FA-buljong

  • Inkubera i 10 dygn i 35 °C - 37 °C.
  • Inokulera och inkubera medier vid tecken på växt. Vid tveksamhet om växt är det lämpligt att gramfärga buljongen samt subkultivera till agarplattor.

Ej kroppseget material i sterilt rör/kärl med förväntad monomikrobiell floratyp

  • Öppna röret och placera materialet i FA-buljong.
  • Inkubera i 10 dygn i 35 °C - 37 °C.
  • Vid växt ta material från buljongröret. Inokulera och inkubera medier.

Ej kroppseget material i sterilt rör/kärl med förväntad polymikrobiell flora¬typ (spiral, dränage)

  • Placera under anaeroba och sterila betingelser.
    • spiralen i steril petriskål och tillsätt FA-buljong. Skaka försiktigt.
    • alternativt i FA-buljongrör och vortexa.
  • Inokulera medier med hjälp av plastpasteurpipett. Gör anaerob odling först.

Blododlingsflaskor med tecken på växt vid ankomst

  • Odla ut vid ankomsten.
  • Inokulera och inkubera medier.
  • Tillsätt näringssubstrat enligt tillverkarens anvisningar.
  • Inkubera flaskorna ett dygn i 36 °C innan eventuell ny utodling (eller tills blod¬odlingssystemet signalerar).
  • Om det växer rikligt på direktutodlade medier behöver provet inte odlas ut igen.

Blododlingsflaskor utan tecken på växt vid ankomst

  • Tillsätt näringssubstrat enligt tillverkarens anvisningar.

Inkubera flaskorna i 36 °C och avläs i fem dygn (eller tills blododlingssystemet signalerar) innan eventuell utodling. Inokulera och inkubera medier.

CAPD (PD), dialysvätska

  • Desinficera dialyspåsen.
  • Aspirera 100 mL dialysvätska och sätt till 2st 50 mL centrifugrör.
  • Centrifugera båda rören i 2000 x g, 10 min.
  • Sug av ovanvätskan med steril engångspipett av plast. Kasta ovanvätskan. Om endast liten mängd sediment, lämna kvar totalt ca 2 mL i röret för utodling.
  • Inokulera från sedimentet: 0,1 mL/agarplatta samt 0,5 mL till anrikningsbuljong.
  • Lägg ev. material på ett märkt objektsglas för direktmikroskopi.
  • Om blododlingsflaskor eventuellt använts, åtgärdas de enligt ovan.


Speciell odling[redigera]

GBS-odling

  • Inokulera provtagningspinnarna från vagina respektive rektum tillsammans i anrikningsbuljong för grupp B streptokocker, ”GBS-buljong”.
  • Inkubera buljongen i 1 dygn 35 o-37 °C.
  • Inokulera en fårblodagarplatta med den inkuberade buljongen.
  • Inkubera plattan i 35 °C -37 °C . Avläs efter 1 dygn. Om ingen växt av GBS, reinkubera agarplattan 1 dygn .
Hämtad från "http://referensmetodik.folkhalsomyndigheten.se/index.php?title=Provsättning&oldid=4302"